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1、目前,臨床上由細(xì)菌引起的感染性疾病的發(fā)病率呈逐年上升的趨勢(shì)。人類和養(yǎng)殖業(yè)中抗生素濫用問題日益嚴(yán)重,由此引發(fā)的耐藥性和動(dòng)物源性食品的藥物殘留等問題,引起愈來愈多人的擔(dān)心。醫(yī)藥界迫切希望能找到新的抗感染藥物,而具有資源豐富、副作用小且不易產(chǎn)生耐藥性等優(yōu)特點(diǎn)的中草藥是目前研究的熱點(diǎn)。
本課題在前期研究的基礎(chǔ)上,以中醫(yī)藥理論為指導(dǎo),通過單味中藥和中藥復(fù)方在體外對(duì)人類和養(yǎng)殖業(yè)中常見致病菌的抗菌作用研究,篩選出抗菌活性最強(qiáng)的復(fù)方作為NZF
2、方。以體外抗菌活性為評(píng)價(jià)指標(biāo),研究NZF方的提取純化工藝,以期得到抗感染作用強(qiáng)的中藥復(fù)方及其活性部位,為抗感染新藥研發(fā)提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ),也為其在養(yǎng)殖業(yè)中的應(yīng)用提供依據(jù)。現(xiàn)將研究結(jié)果分述如下:
?。?)NZF方的組方研究:中藥體外抗菌作用研究采用紙片法和微量稀釋法,以金黃色葡萄球菌、福氏痢疾志賀氏菌、肺炎克雷伯菌、大腸桿菌、鼠傷寒桿菌、腸炎沙門氏菌、白色念珠菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌為受試菌株,通過測(cè)定不同溶劑提取的NZ、HZ、BZ、S
3、L等單味中藥及其組成的中藥復(fù)方的抑菌環(huán)直徑、最低抑菌濃度(MIC)、最低殺菌濃度(MBC)等體外抗菌評(píng)價(jià)指標(biāo),篩選出最佳中藥復(fù)方(NZF方),并對(duì)NZF方的最佳配伍比例進(jìn)行研究。
(2)NZF方的最佳提取工藝研究:以測(cè)定NZF方中指標(biāo)成分W的含量和體外抗菌活性為評(píng)價(jià)指標(biāo),對(duì)NZF方的提取工藝進(jìn)行研究。通過對(duì)NZF方提取工藝的單因素考察(提取方法、溶媒濃度、提取時(shí)間、提取次數(shù)以及料液比),發(fā)現(xiàn)不同提取方法和不同提取時(shí)間中以M2法
4、、提取1h,復(fù)方中指標(biāo)成分W的含量最高,且抑菌效果好;不同溶媒濃度、料液比以及提取次數(shù)提取的NZF方中指標(biāo)成分W的含量各有差別,且體外抑菌效果也不同。根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果,選取不同溶媒濃度、料液比和提取次數(shù)設(shè)計(jì)正交實(shí)驗(yàn)做進(jìn)一步優(yōu)化,得到NZF方的最佳提取工藝為:g%的溶劑Y為溶媒,料液比1:10,M2法提取兩次,每次一小時(shí)。
?。?)NZF方不同極性部位的體外抑菌研究:分別用溶劑S、溶劑E、溶劑X和溶劑Z處理純化NZF方提取物,將
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