CD147在小鼠肝癌細(xì)胞Hca-F、Hca-P淋巴道轉(zhuǎn)移中作用的體內(nèi)研究.pdf

1、浸潤和轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤最主要的生物學(xué)物性，也是腫瘤致死的重要因素。研究腫瘤轉(zhuǎn)移機(jī)制對腫瘤轉(zhuǎn)移的早期診斷和治療具有重要意義。腫瘤轉(zhuǎn)移的方式主要有淋巴道轉(zhuǎn)移、血道轉(zhuǎn)移和種植轉(zhuǎn)移。50﹪以上的腫瘤發(fā)生淋巴道轉(zhuǎn)移，但其發(fā)生機(jī)制尚有待研究。研究表明，腫瘤轉(zhuǎn)移不僅與機(jī)體微環(huán)境有關(guān)，還與腫瘤細(xì)胞自身特性密切相關(guān)，其中細(xì)胞表面糖蛋白的糖基化調(diào)節(jié)起重要作用。 本實驗采用Hca細(xì)胞是從6115小鼠腹水型肝癌細(xì)胞株H22中篩選而出的，具有特異性經(jīng)淋巴道轉(zhuǎn)

2、移的能力，其中高轉(zhuǎn)移株Hca-F細(xì)胞接種615小鼠足墊后，有80﹪的淋巴疲轉(zhuǎn)移力，而低轉(zhuǎn)移株Hca-P細(xì)胞的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率為30﹪。因此，是研究淋巴道轉(zhuǎn)移機(jī)制的較好模型。 目的：在本實驗室前期體外實驗的基礎(chǔ)上，對小鼠肝癌細(xì)胞株Hca-F、Hca-P淋巴道轉(zhuǎn)移情況進(jìn)行研究。分析其經(jīng)淋巴道轉(zhuǎn)移時，CD147的表達(dá)情況、HG-CD147和LG-CD147表達(dá)水平的差異，比較體外實驗的結(jié)果，旨在探討不同糖型CD147在小鼠肝癌細(xì)胞株Hca

3、-F、Hca-P體內(nèi)轉(zhuǎn)移中的作用及其與腫瘤轉(zhuǎn)移的相關(guān)性。 方法：構(gòu)建小鼠肝癌細(xì)胞株Hca-F、Hca-P淋巴道轉(zhuǎn)移動物模型，通過RT-PCR、免疫組化、免疫印跡法，分析小鼠肝癌細(xì)胞株Hca-F、Hca-P淋巴道轉(zhuǎn)移時，CD147基因和蛋白質(zhì)的表達(dá)情況。取得小鼠肝癌細(xì)胞Hca-F、Hca-P淋巴道轉(zhuǎn)移中，不同糖型CD147的表達(dá)的證據(jù)。 結(jié)果：RT-PCR、免疫組化、免疫印跡法結(jié)果顯示，在小鼠肝癌細(xì)胞株Hca-F、Hca-

4、P淋巴道轉(zhuǎn)移中，CD147表達(dá)量較之正常淋巴結(jié)明顯增加，基因和蛋白質(zhì)表達(dá)量具有一致性。其中HG-CD147(分子量40～57kDa)在Hca-F的淋巴結(jié)組織中表達(dá)較多，HG-CD147在Hca-P的淋巴結(jié)組織中表達(dá)較少，正常淋巴結(jié)中無CD147表達(dá)。 結(jié)論：CD147在正常淋巴結(jié)中不表達(dá)，在小鼠肝癌細(xì)胞株Hca-F淋巴道轉(zhuǎn)移中表達(dá)量明顯增加。CD147的糖基化水平不同，其表達(dá)量有差異。HG-CD147在Hca-F中表達(dá)較多，在c