大鼠腦缺血再灌注后TGF-β-,1-的表達(dá)及意義.pdf

1、中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文大鼠腦缺血再灌注后TGF-β的表達(dá)及意義姓名：房曉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師：何志義2000.4.1緩沖 液( P H 7 . 4 ) 2 5 0 m l 左心室灌注， 斷 頭， 取腦， 自 額極至枕葉 分為A , B , C , D , E 5 等 分， 取C 腦片， 置 于4 9 C 4 % 多聚甲 醛 緩沖 液固 定2 4 小時(shí)， 常規(guī) 脫水、 浸蠟、 包埋， 并制 成5 p m 厚冠狀切

2、片。 采用過(guò) 氧 化 酶 標(biāo) 記的 鏈霉 卵白 素 染色 法( S P 法) ， 用 免 疫 組化 方 法檢 測(cè) T G F 一 p : 在 腦 組 織中 的 表 達(dá) 情 況 。結(jié) 果參考L o n g a 及B e d e r s o n 的 方 法， 于 大鼠 蘇醒 后2 h 進(jìn)行5 分制評(píng)分。 評(píng)分標(biāo)準(zhǔn): 0 分， 無(wú)神經(jīng)功能缺 損癥狀; 1 分， 不能完全伸展對(duì)側(cè)前 爪; 2 分， 向 對(duì)側(cè)劃圈; 3 分， 向 對(duì)側(cè)傾倒; 4

3、分， 不能自 發(fā)行 走， 意 識(shí)清晰度下降; 5 分， 死亡。 為 保證缺血再灌注損傷程度的一致 性， 取評(píng)分1 一 2 分者人 選， 其 余舍棄。 腦組織形態(tài)學(xué)觀察: 正常 對(duì)照 組和假手術(shù)組大腦半球外觀正常， 鏡下見(jiàn)雙側(cè)半球組織結(jié)構(gòu)正常。 缺血再灌注組: 大體見(jiàn)額、 穎、 頂部顏色蒼白、 腫脹、 腦表 靜脈 充血， 鏡下見(jiàn) 尾狀核、 大腦皮質(zhì)呈不同 程度的 缺血改變， 核深染固 縮， 胞體皺縮、 膠質(zhì)細(xì)胞增生、 血管擴(kuò)張， 少量白

4、細(xì)胞滲出， 缺 血中 心區(qū) 組織疏松， 形似海 綿 狀。 免 疫組化 染色 結(jié)果顯 示: 正常對(duì)照 組及 假手術(shù)組僅在少量血管中 有微弱的T G F 一 R ， 免疫陽(yáng) 性表 達(dá); 缺血 再灌注 組在 梗塞中 心區(qū) 和 梗塞邊緣帶血管中 有顯著增強(qiáng)的陽(yáng) 性表達(dá)， 軟腦膜的 血管中 亦可 見(jiàn)免疫陽(yáng) 性反應(yīng); 梗塞邊緣帶膠 質(zhì)細(xì) 胞 及神經(jīng)元 有中 等強(qiáng)度的 表達(dá)， 前者的陽(yáng) 性表達(dá)比 例高于后者。 梗塞 對(duì)側(cè)腦組織中 亦可見(jiàn)血管陽(yáng) 性表達(dá)