大鼠腦缺血再灌注后GRP78和GADD153表達研究.pdf

1、目的：腦缺血再灌注后的神經(jīng)細胞凋亡機制目前仍未完全闡明。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激是細胞的一種自我保護機制，但是過強或持續(xù)時間過長的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激則引起細胞凋亡。本實驗擬通過對缺血再灌注大鼠腦內(nèi)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激標志物GRP78 和GADD153 表達及神經(jīng)細胞凋亡的研究，探討內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激與腦缺血再灌注后神經(jīng)細胞凋亡的關(guān)系。 材料與方法：72 只SD 大鼠隨機分為模型組和假手術(shù)組。模型組均用線栓法造成大腦中動脈阻塞，2h 后實現(xiàn)再灌注。按再灌注時間不同分為

2、2h、6h、12h、24h 和48h 組，進行如下實驗：①TUNEL 法檢測細胞凋亡；②RT-PCR 法檢測GRP78 和GADD153 mRNA 表達；③免疫組化和Western-blot 檢測GRP78 和GADD153 蛋白表達。 結(jié)果：①假手術(shù)組偶有神經(jīng)細胞凋亡，模型組神經(jīng)細胞凋亡在缺血再灌注24h 達高峰，與其他各組相比，差異顯著（P<0.01）；②GRP78在各實驗組均有表達，于再灌注12h 達高峰（P<0.05）