12-脂氧合酶通過(guò)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化促進(jìn)胃癌侵襲轉(zhuǎn)移的機(jī)制研究.pdf

1、【目的】：
　　1.構(gòu)建過(guò)表達(dá)12-LOX的SGC-7901胃癌細(xì)胞株。
　　2.分析12-LOX與胃癌細(xì)胞遷移、侵襲能力及與EMT的相關(guān)性。
　　3.分析胃癌組織中12-LOX、E-cadherin、N-cadherin蛋白的表達(dá)水平、與臨床病理特征及三者之間的關(guān)系。
　　【方法】：
　　Q-PCR、Western blot法篩選出低表達(dá)12-LOX的胃癌細(xì)胞株；12-LOX過(guò)表達(dá)的慢病毒感染SGC-79

2、01胃癌細(xì)胞，成功構(gòu)建高表達(dá)12-LOX的胃癌細(xì)胞株；細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)、Transwell法檢測(cè)對(duì)照組 SGC-7901、Mock組 SGC-7901、12-LOX組SGC-7901細(xì)胞的遷移及侵襲能力；Q-PCR、Western blot法檢測(cè)三組細(xì)胞E-cadherin、N-cadherin的表達(dá)及其與12-LOX的關(guān)系；免疫組化檢測(cè)105例胃癌組織和43例正常胃組織中12-LOX、E-cadherin、N-cadherin蛋白的表達(dá)水

3、平；統(tǒng)計(jì)分析胃癌組織12-LOX、E-cadherin、N-cadherin與臨床病理特征的關(guān)系以及三者之間的相關(guān)性。
　　【結(jié)果】：
　　1.成功獲得高表達(dá)12-LOX的胃癌SGC-7901細(xì)胞株。
　　2.胃癌細(xì)胞遷移和侵襲實(shí)驗(yàn)顯示：12-LOX組遷移或侵襲進(jìn)入下室的細(xì)胞數(shù)明顯高于Mock組和Control組，p<0.05。同時(shí)Mock組和Control組未見(jiàn)明顯差異。
　　3. Q-PCR和Western

4、blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：12-LOX組的E-cadherin、N-cadherin mRNA及蛋白的表達(dá)量均明顯高于 Mock組和Control組，p<0.05。12-LOX與Ecadherin、N-cadherin分別呈正相關(guān)。
　　4.胃癌組織中12-LOX和N-cadherin蛋白較正常胃組織表達(dá)增加（P<0.05），而E-cadherin表達(dá)減低（P<0.05）；統(tǒng)計(jì)學(xué)分析表明，E-cadherin與年齡及腫瘤分化程度相關(guān)，