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文檔簡(jiǎn)介
1、背景:在2012年大約有100萬(wàn)的新發(fā)胃癌病例,使胃癌成為全球僅次于肺癌、乳腺癌、結(jié)直腸癌和前列腺癌的第五位最常見(jiàn)惡性腫瘤,70%以上的胃癌病例來(lái)自發(fā)展中國(guó)家,大約一半的胃癌病例發(fā)生在東亞地區(qū)(主要在中國(guó))。胃癌的發(fā)生與環(huán)境因素、遺傳學(xué)及表觀遺傳學(xué)的改變相關(guān)。NKD2是果蠅NKD基因在哺乳動(dòng)物中的同源基因之一。NKD2位于染色體的5p15.3位點(diǎn),該位點(diǎn)在結(jié)直腸癌和胃癌中頻發(fā)雜合性缺失。有研究表明NKD2可以抑制骨肉瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。
2、r> 目的:明確NKD2在胃癌中的作用及機(jī)制,為NKD2在胃癌的診斷、預(yù)后和化療敏感性等方面的應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。
材料與方法:本研究在6株胃癌細(xì)胞系,196例人原發(fā)胃癌組織樣本中通過(guò)半定量RT-PCR、IHC、MSP等技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞系及組織中NKD2的表達(dá)水平及甲基化狀態(tài)。應(yīng)用基因表達(dá)譜芯片、流式細(xì)胞技術(shù)、transwell侵襲遷移實(shí)驗(yàn)及裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)等探討NKD2基因?qū)ξ赴┘?xì)胞增殖、侵襲遷移、細(xì)胞周期的作用及機(jī)制。
結(jié)果
3、:在胃癌細(xì)胞系中NKD1和NKD2基因的表達(dá)受到基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化的調(diào)控。NKD1基因和NKD2基因在196例胃癌組織中的甲基化率分別是11.7%(23/196)和53.1%(104/196)。NKD2的甲基化與胃癌的細(xì)胞分化、TNM分期以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)(P<0.05),而且NKD2非甲基化的胃癌患者的生存期要長(zhǎng)于NKD2甲基化的胃癌患者(P<0.05)。但是NKD1的甲基化與胃癌的細(xì)胞分化、TNM分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、年齡、性別、腫
4、瘤的大小、腫瘤的定位或者血管侵襲均無(wú)相關(guān)性(P>0.05)。在47對(duì)配對(duì)的原發(fā)癌組織和癌旁組織中,20例組織中的NKD2表達(dá)缺失或下降,其中17例為NKD2甲基化,NKD2的表達(dá)缺失或下降與啟動(dòng)子區(qū)的甲基化相關(guān)(P<0.001)。在胃癌細(xì)胞BGC823和MGC803中恢復(fù)NKD2的表達(dá)可抑制細(xì)胞的增殖、克隆形成和侵襲遷移能力。NKD2可以誘導(dǎo)BGC823和MGC803細(xì)胞在G2/M期的阻滯,并可增加BGC823和MGC803細(xì)胞對(duì)多西他
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