豬心肌和骨骼肌中葡萄糖攝取和利用相關(guān)基因的發(fā)育性變化研究.pdf

1、本試驗(yàn)以豬為研究對(duì)象，采用熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)從胚胎90天至出生后7年的發(fā)育過(guò)程中與葡萄糖代謝相關(guān)的30個(gè)mRNA和10個(gè)miRNA在心肌、背最長(zhǎng)肌和腰肌5不同年齡階段的表達(dá)，通過(guò)生物信息學(xué)分析，從轉(zhuǎn)錄水平揭示糖代謝在發(fā)育過(guò)程中隨年齡增長(zhǎng)的變化規(guī)律及糖代謝在心肌、背最長(zhǎng)肌和腰肌中的差異;并通過(guò)mRNA和miRNA相關(guān)性分析，了解mRNA和miRNA在肌肉糖代謝過(guò)程中的共同調(diào)控作用。
　　mRNA研究結(jié)果表明，mRNA的表達(dá)模式存

2、在組織差異。在心肌和背最長(zhǎng)肌中，基因顯著富集的表達(dá)模式為從胚胎90天至出生后7年隨年齡增長(zhǎng)而增加;在腰肌中，基因顯著富集的表達(dá)模式有2種，一種為從胚胎期至30天逐漸增加、之后逐漸降低，另一種為胚胎90天至出生后180天逐漸增加、隨后逐漸降低。
　　分別對(duì)心肌、背最長(zhǎng)肌和腰肌中顯著富集表達(dá)模式中的基因進(jìn)行生物學(xué)通路富集分析，結(jié)果表明，糖酵解、糖原合成及膜轉(zhuǎn)運(yùn)等通路在心肌中富集(PErminJ＜0.05)，即說(shuō)明隨年齡的增長(zhǎng)心肌對(duì)葡萄

3、糖的攝取和利用能力增強(qiáng);糖異生、膜轉(zhuǎn)運(yùn)、磷酸化等通路在背最長(zhǎng)肌中富集，即說(shuō)明背最長(zhǎng)肌利用葡萄糖的能力隨年齡增加而增強(qiáng);與氧化和ATP合成相關(guān)的通路在腰肌中富集，即說(shuō)明隨年齡的增長(zhǎng)，腰肌合成利用葡萄糖有氧氧化合成ATP的能力隨個(gè)體出生逐漸增強(qiáng)，至30日齡達(dá)到最高，隨后呈逐漸降低的趨勢(shì)。
　　miRNA分析結(jié)果表明，心肌、腰肌和背最長(zhǎng)肌中miRNA顯著富集的發(fā)育性變化表現(xiàn)為從胚胎90天至出生后7年miRNA的表達(dá)與年齡的增長(zhǎng)呈負(fù)相關(guān)。

4、
　　mRNA和miRNA相關(guān)性分析獲得44對(duì)表達(dá)量呈顯著負(fù)相關(guān)的mRNA和miRNA，通過(guò)靶基因預(yù)測(cè)和文獻(xiàn)研究，確認(rèn)PFKM和miR-320、PI3K和miR-126、MAPK和miR-24三對(duì)為表達(dá)呈顯著負(fù)相關(guān)的靶標(biāo)mRNA-miRNA。
　　重要功能基因分析結(jié)果表明，各個(gè)年齡階段，糖酵解過(guò)程中的重要調(diào)控基因TPI1、PFKM和MCT-4在背最長(zhǎng)肌中的表達(dá)皆顯著高于心肌和腰肌，而線粒體氧化和ATP合成相關(guān)的基因CS、PD