頸靜脈灌注脂多糖對(duì)奶牛血液生化指標(biāo)、瘤胃發(fā)酵和瘤胃微生物區(qū)系的影響.pdf

1、脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)是革蘭氏陰性菌（Gram Negative Bacteria，GNB）細(xì)胞壁的一個(gè)重要組成部分。在GNB大量死亡或快速生長(zhǎng)的過程中，細(xì)胞壁破裂會(huì)釋放大量LPS進(jìn)入機(jī)體，引發(fā)各種疾病?，F(xiàn)如今的奶牛飼養(yǎng)過程中，人們常提高奶牛飼糧中精料的比例來增加奶產(chǎn)量。奶牛短時(shí)間內(nèi)攝入大量易降解飼料，在瘤胃內(nèi)迅速發(fā)酵，產(chǎn)生較高濃度的揮發(fā)性脂肪酸(Volatile Fatty Acids，VFA)，使瘤胃

2、pH值降低，誘發(fā)亞急性瘤胃酸中毒（Sub-acute Ruminal Acidosis，SARA）。瘤胃內(nèi)環(huán)境的改變會(huì)影響瘤胃內(nèi)微生物區(qū)系，導(dǎo)致微生物死亡，大量LPS進(jìn)入瘤胃和外周血液，進(jìn)而對(duì)機(jī)體產(chǎn)生影響。為研究SARA過程中奶牛的生理和瘤胃內(nèi)變化，我們對(duì)三頭泌乳后期奶牛灌注不同劑量的LPS（Escherichia coli O111∶ B4）建立動(dòng)物模型，采集血液和瘤胃樣品。通過檢測(cè)血液樣品研究LPS對(duì)奶牛生理的影響;然后通過測(cè)定瘤胃

3、發(fā)酵產(chǎn)物探究LPS對(duì)瘤胃發(fā)酵的作用;最后對(duì)瘤胃內(nèi)微生物區(qū)系進(jìn)行分析，闡明LPS對(duì)瘤胃微生物區(qū)系的影響。
　　1頸靜脈灌注LPS對(duì)奶牛血液生化指標(biāo)的影響
　　本試驗(yàn)研究了脂多糖(LPS)對(duì)奶牛外周循環(huán)中血蛋白、血脂和氨基酸濃度的影響。試驗(yàn)選用3頭泌乳后期，體重為500±25 kg的奶牛。采用3×3拉丁方試驗(yàn)設(shè)計(jì)，LPS（Escherichia coliO111∶ B4）灌注劑量為0、0.4和0.8μg/kg.BW，試驗(yàn)分3期進(jìn)

4、行，每期15d。結(jié)果表明，灌注LPS顯著提高了奶牛血液中尿素氮(P＜0.05)和甘油三酯(p＜0.05）的含量，極顯著降低了白蛋白、球蛋白、總蛋白、總膽固醇、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白的含量(P＜0.01)。LPS灌注導(dǎo)致血液中葡萄糖水平極顯著下降(P＜0.01)。灌注LPS顯著降低了奶牛血液中天冬氨酸、蘇氨酸、絲氨酸、甘氨酸、瓜氨酸、α-氨基正丁酸、異亮氨酸、精氨酸和脯氨酸的含量(P＜0.05)，但對(duì)纈氨酸、鳥氨酸、賴氨酸、磷-絲氨酸

5、、尿素、谷氨酸、氨基肥酸、丙氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、羥賴氨酸、組氨酸、γ-氨基正丁酸、1-甲基組氨酸、3-甲基組氨酸、乙醇胺、胱硫醚和肌肽含量無顯著影響(P＞0.05)。結(jié)果提示，頸靜脈灌注LPS顯著降低了奶牛血液中蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和部分氨基酸的含量，研究推測(cè)，高精料下從消化道移位的LPS可能通過機(jī)體的免疫應(yīng)答，影響奶牛血液中乳蛋白與乳脂前體物的含量。
　　2頸靜脈灌注LPS對(duì)奶牛瘤胃發(fā)酵的影響
　　試

6、驗(yàn)使用三頭泌乳后期的經(jīng)產(chǎn)奶牛，采用3×3拉丁方試驗(yàn)設(shè)計(jì)，分別灌注0、0.4、0.8μg/kg劑量的LPS(Escherichia coli O111∶ B4)，并對(duì)瘤胃指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明，灌注LPS使瘤胃pH顯著降低(P＜0.001)，瘤胃內(nèi)乙酸、丙酸、丁酸、異丁酸、戊酸、異戊酸、總揮發(fā)酸和氨氮的濃度隨灌注劑量增加呈線性增加(P＜0.001)，瘤胃內(nèi)乙丙比顯著升高(P=0.006)。灌注LPS顯著降低了精料和粗料中有機(jī)物降解率(p＜

7、0.001)。然而，灌注LPS對(duì)瘤胃上皮中Na+/K+ ATP酶的基因表達(dá)沒有產(chǎn)生影響，一元羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體(MCT)1、2和4的表達(dá)同樣沒有受到影響(P＞0.10）。結(jié)果表明，頸靜脈灌注LPS顯著影響了瘤胃發(fā)酵，但對(duì)VFA的吸收沒有顯著影響。
　　3頸靜脈灌注LPS對(duì)瘤胃內(nèi)微生物區(qū)系的影響
　　試驗(yàn)使用三頭泌乳后期的經(jīng)產(chǎn)奶牛，采用3×3拉丁方試驗(yàn)設(shè)計(jì)，研究灌注0、0.4、0.8μg/kg劑量的LPS(Escherichia c