Hes1和Hes2差異性表達(dá)影響肝癌術(shù)后預(yù)后.pdf

1、肝細(xì)胞癌(HCC)是人類最常見(jiàn)的致命性腫瘤之一，在全球腫瘤死亡原因中排列第五。根治性切除是HCC治療的首選治療方法，但是預(yù)后尚不理想，首要原因是肝內(nèi)復(fù)發(fā)。尋找理想的肝癌術(shù)后預(yù)后價(jià)值指標(biāo)，并據(jù)此選擇合理的輔助治療對(duì)改善預(yù)后有重要意義。臨床上早期肝癌接受肝切除者日益增加，故尋找對(duì)早期肝癌預(yù)后判斷的分子標(biāo)記甚為重要，迄今為止應(yīng)用臨床的肝癌術(shù)后預(yù)后分子標(biāo)志，尤其是適用于早期者仍然缺乏。因此探索與肝癌轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)相關(guān)的分子，并按照該分子區(qū)分患者的預(yù)

2、后，具有重要的臨床意義。本課題在我們首先檢測(cè)出Hes1和Hes2在配對(duì)的肝癌組織和癌旁組織中的表達(dá)，結(jié)合臨床病例分析，研究其表達(dá)水平對(duì)肝癌術(shù)后預(yù)后尤其是探索其對(duì)早期肝癌預(yù)后是否有判斷作用，為使其可能成為肝癌治療靶點(diǎn)提供理論和臨床依據(jù)。
　　 第一部分，Notch信號(hào)通路下游分子Hes1和Hes2在肝癌組織中的表達(dá)
　　 目的：檢測(cè)Hes1和Hes2在肝癌組織和配對(duì)的癌旁組織中的表達(dá)情況。
　　 方法：用實(shí)時(shí)定量R

3、T-PCR從mRNA水平檢測(cè)Hes1和Hes2的表達(dá)水平，研究配對(duì)肝癌組織和癌旁組織中基因表達(dá)情況，并通過(guò)westernblot進(jìn)行驗(yàn)證，然后通過(guò)免疫組化法確定它們?cè)诟伟┙M織中的表達(dá)水平，前瞻性觀察2007.1-2008.12中連續(xù)入組的330例接受根治性切除的肝癌患者癌組織中Hes1和Hes2的表達(dá)水平和患者預(yù)后的關(guān)系。
　　 結(jié)果：Hes1mRNA在24對(duì)肝癌組織中的表達(dá)水平低于配對(duì)癌旁組織，Hes2mRNA在23對(duì)肝癌組織

4、中的表達(dá)水平同樣低于配對(duì)癌旁組織；Westernblot結(jié)果顯示：Hes1蛋白表達(dá)水平在肝癌組織中的表達(dá)水平低于對(duì)應(yīng)的癌旁組織，癌組織中低表達(dá)，癌旁組織中高表達(dá)，Hes2具有同樣的結(jié)果；我們以免疫組化分別檢測(cè)Hes1和Hes2在肝癌組織和配對(duì)癌旁組織中的表達(dá)情況，也證實(shí)了這一結(jié)果。
　　 第二部分，Hes1和Hes2在肝癌組織中的表達(dá)與肝癌術(shù)后預(yù)后關(guān)系
　　 目的：
　　 探討Hes1和Hes2在肝癌組織中的表達(dá)

5、差異與肝癌患者術(shù)后的預(yù)后的關(guān)系。
　　 方法：
　　 1、病例資料
　　 我們研究分析上海東方肝膽外科醫(yī)院2007年至2008年間共400例根治性切除肝癌患者。經(jīng)過(guò)排除標(biāo)準(zhǔn)后篩選后，共330例納入研究。
　　 2、手術(shù)方式
　　 手術(shù)均為根治性肝切除術(shù)，其標(biāo)準(zhǔn)為：所有腫塊均已完整切除；書(shū)中超聲證實(shí)無(wú)腫瘤殘余；組織學(xué)檢查切緣陰性；術(shù)前升高的AFP水平術(shù)后2個(gè)月降至正常；術(shù)后2個(gè)月內(nèi)影像學(xué)檢查未見(jiàn)肝內(nèi)

6、新發(fā)病灶。
　　 3、隨訪
　　 所有病例術(shù)后均進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化隨訪。隨訪終點(diǎn)時(shí)間為2010年12月1日，中位隨訪時(shí)間為18個(gè)月。
　　 4、統(tǒng)計(jì)方法
　　 至復(fù)發(fā)時(shí)間(TTR)和總體生存(OS)是我們?cè)擁?xiàng)研究的兩個(gè)主要終點(diǎn)。TTR是從患者手術(shù)當(dāng)天到診斷為復(fù)發(fā)為止，總體生存是從患者手術(shù)當(dāng)天到患者死亡為止，如果患者沒(méi)有死亡，則計(jì)算到隨訪結(jié)束時(shí)。所以的統(tǒng)計(jì)都是用SPSS18.0完成的。計(jì)數(shù)資料以X2或者Fisher

7、確切概率法檢驗(yàn)，計(jì)量連續(xù)資料以Student-t檢驗(yàn)，資料分布不均是以Mann-Whitney檢驗(yàn)。復(fù)發(fā)和生存曲線以Kaplan-Meier完成并以log-rank檢驗(yàn)。Cox模型單因素分析后，將有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的變量帶入Cox模型多因素分析以確定對(duì)預(yù)后有獨(dú)立影響的因素，P＜0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 Hes1和Hes2在肝癌組織中的表達(dá)低于配對(duì)癌旁組織。在前瞻性研究中Hes1和Hes2低表達(dá)患者比高表達(dá)患