中國明對蝦抗脂多糖因子基因克隆及其在大腸桿菌中的重組表達.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文對中國明對蝦抗脂多糖因子基因克隆及其在大腸桿菌中的重組表達進行了研究。主要成果如下： 1．中國明對蝦ALF基因克隆根據(jù)在其它相近物種所得ALF基因的保守區(qū)進行比對，設計了中國明對蝦克隆ALF基因中間片段的兼并引物，通過多次試驗成功探索到克隆ALF基因的最佳條件，并克隆到280 bp的片段，據(jù)測序結果分別設計了克隆ALF3’和5’端的引物，利用它們分別和3’錨定引物、5’PCR Primer組成一對引物，克隆到了ALF的3’和

2、5’端，通過測序并拼接獲得了中國明對蝦ALF全長基因。 2．重組表達載體的構建將已克隆到的中國明對蝦ALF基因分別以pET-30a(+)和pGEX-4T-1為載體構建重組載體。 3．ALF基因在大腸桿菌的表達將構建好的重組載體轉(zhuǎn)化感受態(tài)的大腸桿菌BL21，對中國明對蝦的ALF基因在原核中的表達進行了研究，并對其表達的蛋白進行純化。在表達過程中成功解決了基因中含有大腸桿菌稀有密碼子引起的表這量低的難題。為研究者在解決表達量

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