SHE78-7對(duì)宮頸癌細(xì)胞株HCE1多細(xì)胞球體5-FU敏感性及P27表達(dá)的影響.pdf

1、目的：探討E-鈣粘蛋白單克隆抗體SHE78-7能否增強(qiáng)宮頸癌細(xì)胞株HCE1多細(xì)胞球體對(duì)5-FU敏感性及對(duì)P27表達(dá)的影響
　　 方法：
　　 （一）運(yùn)用液體重疊法和旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)法培養(yǎng)宮頸鱗癌HCE1多細(xì)胞球體。
　　 （二）WST-1法檢測(cè)SHE78-7干預(yù)細(xì)胞黏附前后，不同濃度梯度的5-FU對(duì)HCE1多細(xì)胞球體的增殖抑制作用，以單層細(xì)胞作為對(duì)照，分別計(jì)算半數(shù)抑制率濃度IC50值，多細(xì)胞耐藥指數(shù)MCRI，并繪制濃度—

2、抑制率曲線。
　　 （三）免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)SHE78-7干預(yù)前后HCE1多細(xì)胞球體P27的表達(dá)，以單層細(xì)胞作為對(duì)照。
　　 （四）流式細(xì)胞儀檢測(cè)SHE78-7干預(yù)前后HCE1多細(xì)胞球體細(xì)胞周期分布變化，以單層細(xì)胞作為對(duì)照。
　　 結(jié)果：
　　 （一）多細(xì)胞球體的培養(yǎng)：HCE1細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)：顯微鏡下見HCE1細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好，旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)24小時(shí)可見細(xì)胞聚集成團(tuán)，并隨培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，結(jié)構(gòu)更加緊密，直徑逐漸增大

3、，第4天可出現(xiàn)中心壞死。
　　 （二）WST-1法檢測(cè)單克隆抗體SHE78-7干預(yù)細(xì)胞黏附前后，不同濃度梯度的5-FU對(duì)HCE1多細(xì)胞球體的增殖抑制作用，以單層細(xì)胞作為對(duì)照：(1)SHE78-7干預(yù)細(xì)胞黏附前：5-FU作用于單層細(xì)胞的IC502D：14.44ug/ml，多細(xì)胞球體的IC503D：26.56ug/ml，MCRI：1.84。(2)SHE78-7干預(yù)細(xì)胞黏附后：5-FU作用于單層細(xì)胞的IC502D’：12.12ug/m

4、l，多細(xì)胞球體的IC503D’：14.20ug/ml，MCRI’：1.17。
　　 濃度—抑制率曲線顯示：5-FU對(duì)HCE1多細(xì)胞球體的增殖抑制作用呈劑量依賴關(guān)系，SHE78-7干預(yù)后，5-FU的IC50值及MCRI值均明顯下降。
　　 （三）免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)SHE78-7干預(yù)HCE1多細(xì)胞球體前后P27的表達(dá)：SHE78-7干預(yù)HCE1細(xì)胞前后：多細(xì)胞球體P27高表達(dá)率分別為53.3％、26.7％，兩者差異有顯著性(

5、P＝0.04)；而單層細(xì)胞P27在干預(yù)前后均低表達(dá)，兩者差異無顯著性(P＞0.05)。
　　 （四）流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)SHE78-7干預(yù)HCE1多細(xì)胞球體前后細(xì)胞周期分布變化：
　　 ①SHE78-7干預(yù)前：HCE1多細(xì)胞球體與單層細(xì)胞G0/G1期細(xì)胞百分率分別為66.76±3.68、32.96±3.21，差異具顯著性(P＜0.05)：S期細(xì)胞百分率分別為16.42±1.60、46.54±4.52，差異具顯著性(P＜0.05

6、)。
　　 ②SHE78-7干預(yù)后：
　　 單細(xì)胞組 G0/G1期細(xì)胞百分率從干預(yù)前32.96±3.21下降至11.12±5.12，差異具顯著性(P＜0.05)；S期細(xì)胞百分率從干預(yù)前46.54±4.52升高至53.06±6.10，差異無顯著性(P＝0.21)
　　 多細(xì)胞球體組 G0/G1期細(xì)胞百分率從干預(yù)前66.76±3.68下降至34.25±2.36，差異具顯著性(P＜0.05)；S期細(xì)胞百分率從干預(yù)前16