Profilin-1在AGEs誘導的血管重塑中的作用及機制研究.pdf

1、目的:大量研究表明AGEs與糖尿病血管病變并發(fā)癥及動脈粥樣硬化有關，肌動蛋白調(diào)節(jié)蛋白profilin-1介導的肌動蛋白的重組和再分布是內(nèi)皮細胞收縮、血管通透性升高的主要病理基礎。已有研究報道在冠心病患者動脈粥樣斑塊中profilin-1的表達增加，但其是否參與糖尿病大血管病變未見相關報道。本課題擬探討糖尿病(diabetes mellitus，DM)合并冠心病(coronary heart disease，CHD)患者血漿中profil

2、in-1及糖基化終產(chǎn)物受體(receptor for advanced glycation end-products，RAGE)的水平及與冠脈狹窄程度的相關性研究;并進一步在外源性晚期糖基化終產(chǎn)物(advancedglycation end products，AGEs)誘導大鼠血管病變模型和體外培養(yǎng)的大鼠主動脈血管平滑肌細胞(Rats arotal Smooth muscle cell)，深入探討profilin-1在AGEs誘導血管重

3、塑中的作用及相關通路，為尋找新的抗血管病變發(fā)生的作用靶點提供理論依據(jù)。
　　方法:1.選取31例冠心病患者及31例糖尿病合并冠心病患者和27例健康者，在其知情同意的情況下，收集血標本，采用Elisa試劑盒檢測profilin-1、RAGE的血漿水平。2.采用SD大鼠尾靜脈注射AGEs-BSA(25mg/kg, i.v.qd，連續(xù)2月)誘導血管損傷模型，采用HE染色、Mallory染色、免疫組化(Immunohistochemist

4、ry，IHC)檢測組織形態(tài)學變化及相關指標的改變，采用Western blot及real time-PCR檢測主動脈profilin-1的表達。3.在體外培養(yǎng)的大鼠主動脈平滑肌細胞，采用不同濃度的外源性AGEs處理不同時間，采用MTT法檢測平滑肌的增殖，Western blot、real time-PCR檢測profilin-1及JNK、STAT3的表達情況。
　　結(jié)果:1.與正常對照組比較，CHD組及CHD合并DM組血漿Prof

5、ilin-1及RAGE水平明顯升高，線性回歸顯示:冠脈狹窄程度與血漿profilin-1水平及血漿RAGE水平正相關，且血漿profilin-1水平及RAGE水平呈正相關。2.與正常對照組相比，AGEs大鼠HE染色顯示主動脈有明顯的形態(tài)學改變，血管重塑指標IMT/LD、MA/LA、平滑肌層數(shù)均有明顯增加，IHC蛋白定量顯示各組織中profilin-1的平均光密度值(Averageoptical density，AOD)及表達面積率、積分

6、光密度值(Integral opticaldensity，IOD)明顯增加，Western blot及real time-PCR顯示主動脈profiin-1表達增加。3.在體外培養(yǎng)的主動脈平滑肌細胞，結(jié)果顯示隨著AGEs濃度的增加其先增殖后受到抑制;在相同藥物濃度處理下，隨著處理時間的延長其先增殖后受到抑制。Western blot及real time-PCR結(jié)果顯示，其基因表達情況與蛋白表達情況一致，相關通路結(jié)果顯示profilin-