綿羊瘤胃內(nèi)纖維素分解菌的分離鑒定及白色瘤胃球菌纖維素酶celB基因的克隆.pdf

1、內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文綿羊瘤胃內(nèi)纖維素分解菌的分離鑒定及白色瘤胃球菌纖維素酶celB基因的克隆姓名：程超申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：郝永清20070501I s o l a t i o na n d i d e n t i f i c a t i o no f b a c t e r i u m d e g r a d i n gt h ec e l l u l o s e i nr u m e no f s h e

2、 e p a n d C l o n i n g o f c e l BG e n e i nR ．a(chǎn) l b u s ．A b s t ．r a c tF i r s t l y , w eu s e dc e l l u l o s e ( p a p e r m f i l t e r ) a s t h eo n l y c a r b o ns o u r c e ，f o u rk i n d s o fb a c t e

3、r i u m ( T h e s e n e w s p e c i e sa r e t e n t a t i v e l yn a m ea sb a c i l l u sH 1 ．H 2 ．H 3 ．H 4 ．) t h a ti sh i g h l y c e l l u l o l y t i ci nt h ev l n n e no f s h e e p f e dh i g h - f i b e rd i e

4、 t sa r e i s o l a t e do nt h es e l e c t e dm e d i u m ．T h e ya r e i d e n t i f i e d ．T h e s e a r e C ．c e l l o b i o a r u m ，R ．f l a v e f a c i e n s 、R ．a(chǎn) l b u s 、E s u c c i n o g e n e s a c c o r d i

5、 n g t oi t sm o r p h o l o g i c a l c h a r a c t e r i s t i c s a n d c u l t u r e c h a r a c t e r i s t i c s ．S e c o n d l y , a c c o r d i n gt o t h ec e l Bg e n es e q u e n c er e g i s t e r e di nG e n

6、 B a n k ，w e d e s i g n e do n ep a i r so fs p e c i a lp r i m e r sf o rt h e c e l Bg e n e ．B y p r i m e rp o l y m e r a s e c h a i nr e a c t i o n( P C R ) ．t h e D N A f r a g m e n t a b o u t4 0 7 b pw a s

7、a m p l i f i e df r o m R ．a(chǎn) l b u s ，f u r t h e r m o r e ，t h ef r a g m e n t w a s i n s e r t e d i n t o p M D 19 - T v e c t o r a n d i d e n t i f i e d w i t h P C ＆：h e p o s i t i v er e c o m b i n a n tc

8、l o n e sw a ss e q u e n c e da n da n a l y s e d ．i tw a st h ec e l Bs e q u e n c er e g i s t e r e di nG e n B a n k ．T h er e s u l t ss u g g e s t e d t h a t c e l Bg e n ew a sc l o n e ds u c c e s s f u l l

9、 ya n d a l l s h o u l dp r o v i d e e f f e c t i v e e x p e r t m e n m l m a t e d a l st of u r t h e r r e s e a t c h c e l l u l a s e 。K e y w o r d s ：R u m e n ，B a c t e r i u mc a p a b l e o f d e g r a d

10、 i n gt h e c e l l u l o s e ，R ．a(chǎn) l b u s ，I s o l a t i o n ，I d e n t i f i c a t i o n ，C l o n e0 ir e e f e d b y ：P r o f ．H A OY o n g q i n g ( P h ．D )A p p l le a n t f o r M a s t e r d e g r e e ：c h e n g

11、c h a o ( p r e v e n t i v e v e t e r i n a r ys c i e n c e )( C o l l e g eo f A m m a l S c m n c ea n d M e d t c m e ．i n n e rM o n g o l i a A g r i c u l t u r a lU n i v e r s i t y ，H u h h o t0 1 0 0 1 8 ，C