早發(fā)型帕金森綜合征患者PLA2G6基因突變分析及突變體PLA2G6蛋白活性測定.pdf

1、背景：
　　 帕金森病(Parkinson's disease,PD)是一種常見的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病。多數(shù)病人為散發(fā),但少數(shù)基因突變也可引起遺傳性的帕金森病。早發(fā)性帕金森綜合征(early-onset parkinsonism,EOP)是發(fā)病年齡較早(≤50歲)的具有帕金森特征的一組綜合征。從遺傳方式上看,EOP少部分呈隱性遺傳,大部分為散發(fā)病人。早先Parkin(PARK2)、DJ-I(PARK6)、PINKI(PARK7)等

2、基因突變被認(rèn)為同典型的EOP有關(guān)。而ATP13,42(PARK9)and FBX07(PARK15)基因則導(dǎo)致早發(fā)復(fù)雜型帕金森綜合征,除常見的帕金森病癥狀外尚可伴有癡呆、肌張力障礙,及錐體束征等附加癥狀。目前研究認(rèn)為PLA2G6基因與ATP13A2、FBXO7基因類似,其突變與常染色體隱性遺傳性復(fù)雜型帕金森綜合征相關(guān),為了研究PLA2G6基因的突變率及相關(guān)表型,我們在一組EOP病人中進(jìn)行了PLA2G6基因突變檢測。
　　 目的：

3、
　　 明確中國漢族人群早發(fā)帕金森綜合征患者是否存在PLA2G6基因突變,并進(jìn)一步應(yīng)用多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體PET-CT及突變體PLA2G6蛋白活性測定,探討新發(fā)現(xiàn)PLA2G6基因突變致病的可能機(jī)制。
　　 方法：
　　 我們選擇了52個(gè)已排除了parkin、PINKI、DJ-1、ATP13A2、FBXO7基因突變的發(fā)病年齡≤50歲的早發(fā)帕金森綜合征病人,其中12例病人為常染色體隱性遺傳早發(fā)帕金森綜合征(AREP)家系先證

4、者,其余39人為散發(fā)的早發(fā)帕金森綜合征病人。應(yīng)用DNA直接測序技術(shù)對整個(gè)PLA2G6基因的17個(gè)外顯子及外顯子,內(nèi)含子交界區(qū)進(jìn)行測序。對攜帶有PLA2G6基因純合突變的先證者家系進(jìn)行11C-CTF作為DAT示蹤劑的PET-CT分子成像研究,并對新發(fā)現(xiàn)的突變體PLA2G6蛋白進(jìn)行了酶活性測定。
　　 結(jié)果：
　　 在一個(gè)AREP家系先證者中發(fā)現(xiàn)了一個(gè)新的PLA2G6基因純合錯(cuò)義突變c.G991T(p.D331Y)。分別在兩

5、個(gè)散發(fā)EOP患者中發(fā)現(xiàn)一個(gè)新的PLA2G6基因雜合錯(cuò)義突變c.G2036T(p.V679D),一個(gè)新的雜和同義突變,c.C511T,(p.L171L)。對攜帶p.D331Y突變家系進(jìn)行了家系共分離研究,發(fā)現(xiàn)一個(gè)先證者的妹妹(Ⅳ:4)也攜帶了p.D331Y純合突變,但目前無帕金森病。以11C-CFT標(biāo)記的多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體PET-CT發(fā)現(xiàn):攜帶p.D331Y突變患者的多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體顯像信號雙側(cè)對稱性顯著減低,符合典型帕金森病改變;而在無臨床癥狀的

6、突變攜帶者(Ⅳ:4)中:右側(cè)殼核后部多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體信號明確減低,提示突變攜帶者(Ⅳ:4)多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體功能受損,為癥狀前患者。在體外實(shí)驗(yàn)中,p.D331Y突變造成PLA2G6酶的活性降低約70％,進(jìn)一步證實(shí)p.D331Y為致病突變。
　　 結(jié)論：
　　 1.中國大陸早發(fā)型帕金森綜合征患者中存在PLA2G6基因突變。
　　 2.多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體PET-CT結(jié)果證明新的PLA2G6基因p.D331Y突變?yōu)橹虏⊥蛔?該突變無癥