乳牙高發(fā)齲與變鏈菌黏附關(guān)系的初步研究.pdf

1、目的：(1)分析2歲兒童口腔菌斑中變鏈菌的檢出率與乳牙高發(fā)齲的關(guān)系。(2)分析變鏈菌蔗糖依賴性黏附能力與乳牙高發(fā)齲的關(guān)系。(3)了解變鏈菌srtA基因突變情況，并探討srtA基因多態(tài)性與乳牙高發(fā)齲的關(guān)系。
　　 方法：①對(duì)廣州市郊花都區(qū)入托前體檢的2歲兒童394名進(jìn)行乳牙齲病的流行病學(xué)調(diào)查，選取齲失補(bǔ)牙數(shù)≥5兒童32名作為高齲組；按性別配對(duì)，采用簡(jiǎn)單隨機(jī)抽樣方法在無齲兒童中抽取32名作為無齲組對(duì)照。②采集高齲無齲兒童前牙菌斑，應(yīng)

2、用形態(tài)學(xué)、生理生化學(xué)方法對(duì)其牙菌斑中變鏈菌進(jìn)行分離鑒定。③采用分光光度比濁法，檢測(cè)高齲兒童和無齲兒童變鏈菌臨床分離株對(duì)玻壁的黏附情況。④隨機(jī)選取高齲組和無齲組臨床分離株變鏈菌各15株作為srtA基因遺傳多態(tài)性的研究對(duì)象。提取臨床分離菌株變鏈菌基因組DNA，設(shè)計(jì)引物，采用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)擴(kuò)增包含srtA基因的片斷，將純化的PCR產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序，運(yùn)用BioEdit軟件分析變鏈菌srtA基因突變情況，SPSS13.0軟件分析乳牙高發(fā)齲

3、與變鏈菌srtA基因多態(tài)性的關(guān)系。
　　 結(jié)果：(1)64名兒童中變鏈菌的檢出率為56.3％，高齲組兒童變鏈菌檢出率(75.0％)顯著高于無齲組兒童(37.5％)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。生化鑒定獲得高齲兒童75株和無齲兒童34株變鏈菌臨床分離株。(2)在含1％蔗糖的培養(yǎng)基中，高齲組變鏈菌分離株對(duì)玻壁的黏附比為0.58±0.15，略高于無齲組0.56±0.13，但兩組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(3)30株變鏈菌臨床分離株均擴(kuò)

4、增出包含srtA基因的片段，BioEdit軟件分析結(jié)果顯示變鏈菌srtA基因741bp已測(cè)出，沒有堿基的插入與缺失。(4)以變鏈菌標(biāo)準(zhǔn)菌株UA159作為對(duì)照，BioEidt軟件分析結(jié)果顯示，在已測(cè)序的30株臨床分離株變鏈菌srtA基因中有20個(gè)堿基突變位點(diǎn)，即發(fā)生在23、34、36、47、78、99、112、114、150、165、168、176、186、222、249、261、312、470、636、671位堿基上。(5)20個(gè)突變位

5、點(diǎn)中有10個(gè)位點(diǎn)屬于同義突變，即78、99、150、165、186、222、249、261、312、636位堿基。其余10個(gè)堿基位點(diǎn)屬于錯(cuò)義突變，即23、34、36、47、112、114、168、176、470、671位堿基，x2檢驗(yàn)結(jié)果顯示各突變位點(diǎn)在高齲無齲組間的差異均沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)論：①2歲兒童變鏈菌檢出率與高發(fā)齲相關(guān)。②未見2歲兒童變鏈菌蔗糖依賴性黏附力與齲病高發(fā)相關(guān)。③30株臨床分離株變鏈菌srtA基因中存