小分子透明質(zhì)酸片段復(fù)合物在創(chuàng)傷愈合中的作用及相關(guān)分子機(jī)制研究.pdf

1、目的： 制備透明質(zhì)酸寡糖片段（Hyaluronan oligosaccharides，oHA）。建立皮膚創(chuàng)傷動(dòng)物模型，研究oHA對(duì)皮膚傷口愈合的作用及可能機(jī)理。 方法： 1、根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室成熟的FACE方法制備特定分子量大小的oHA。2、建立一種改進(jìn)的動(dòng)物皮膚創(chuàng)傷模型及可行的給藥方式。3、利用Western-blot、RT-PCR等方法檢測oHA刺激下，eNOS、E-selectin、integrinβ3等創(chuàng)傷愈合

2、相關(guān)分子的表達(dá)情況。 結(jié)果： 1．FACE可鑒定oHA的最小片斷為HA4(即2個(gè)二糖單元的長度)。用該技術(shù)鑒定oHA分子量及片斷大小，純度完全達(dá)到試驗(yàn)要求。 2．建立了一種改進(jìn)的動(dòng)物皮膚創(chuàng)傷愈合模型，結(jié)果穩(wěn)定，重復(fù)性好。 3、外源性oHA在1000μg/ml濃度時(shí)可明顯促進(jìn)C57小鼠傷口愈合。 4、外源性oHA在10μg/ml濃度6小時(shí)可以提高eNOS、E-selectin、integrinβ3

3、等的基因表達(dá)。 5、外源性oHA在10μg/ml濃度24時(shí)可顯著促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞中eNOS、integrin β3的蛋白表達(dá)。 結(jié)論：本研究建立了一種新的、簡便的鑒定分離純化透明質(zhì)酸寡糖分子的方法，該方法敏感性高，易于操作。通過體內(nèi)體外研究發(fā)現(xiàn)，oHA具有促進(jìn)創(chuàng)傷愈合的作用。可能的機(jī)制為：oHA通過刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞，使eNOS、integrinβ3等高表達(dá)以及E-selectin較弱表達(dá)，從而促進(jìn)了新生血管形成(Angi