再生障礙性貧血患者CX3CR1介導(dǎo)的T細胞趨化和黏附功能異常.pdf

1、背景與目的:再生障礙性貧血（簡稱再障）是一種免疫失衡性疾病，全血細胞減少，骨髓造血功能低下，是其最明顯的臨床特征。幾乎百分之七十的再障患者病情是通過免疫抑制治療獲得改善。然而，關(guān)于觸發(fā)原始抗原及免疫侵襲對造血干細胞損傷的機制卻鮮為人知。近年來，由于免疫學(xué)技術(shù)水平的提高，促進我們認(rèn)為再障的發(fā)病機制由于一種器官特異性T細胞介導(dǎo)作用于骨髓而引起。特異性的淋巴細胞群在遷移和微環(huán)境調(diào)控方面受到趨化因子及黏附分子多步驟調(diào)節(jié)。CX3CL1，也被稱為F

2、ractalkine，是四種類型趨化因子中最特殊的一種，最初的描述是在表達的IL-1和TNF-活化的內(nèi)皮細胞(EC)上的，并且在人類及小鼠組織上廣泛表達mRNA。CX3CR1（之前稱為V28的孤兒受體），具有誘導(dǎo)運動和細胞內(nèi)鈣動員和激活異源三聚體G蛋白，同時介導(dǎo)白細胞的遷移和黏附的能力。此外，CX3CR1的牢固黏附能力并不受百日咳毒素及靜態(tài)和生理條件下流動的單核細胞，T細胞，自然殺傷(NK)細胞的作用而抑制。由于趨化因予能誘導(dǎo)某些細胞亞

3、群遷移到特定部位，因而趨化因子和趨化因子受體的相互作用被認(rèn)為是在內(nèi)壞境穩(wěn)態(tài)和炎癥中發(fā)揮重要作用。之前的研究中我們通過流式檢測了再障患者T細胞亞群的變化，結(jié)果顯示再障患者骨髓中CD3+、CD8+細胞比例均明顯升高，重型再障患者CD4+細胞比例減低。再障患者T淋巴細胞表面CX3CR1的表達無論在骨髓和外周血中CD3+/CX3CR1+、CD3+/CD4+/CX3CR1+以及CD3+/CD8+/CX3CR1+細胞比例均高于對照組，尤其是CD3+

4、/CD8+/CX3CR1+細胞比例升高尤為顯著。ELISA方法進一步檢測了Fractalkine水平在重型與非重型再障患者骨髓中以及重型再障患者外周血漿中均升高。
　　 本研究通過探討CX3CL1/CX3CR1對獲得性再生障礙性貧血患者CD4+和CD8+T細胞遷移和黏附功能的影響進一步揭示T細胞介導(dǎo)的再障的發(fā)病機制。此外，我們進一步通過對CX3CR1拮抗劑F1的研究提示對CX3CR1的阻斷有望成為治療再障的新靶點開辟途徑。

5、>　　 方法:1.17例重型再障患者和10例健康對照，應(yīng)用MACS免疫磁珠分選法分選CD4+和CD8+T細胞，在自身骨髓血漿或CX3CR1的配體CX3CL1的作用下通過Transwell遷移實驗比較患者和健康對照CD4+和CD8+T細胞表面CX3CR1介導(dǎo)的趨化活性以及阻斷CX3CR1對其趨化活性的影響;
　　 2.采用細胞基質(zhì)黏附實驗比較患者和健康對照CX3CL1/CX3CR1介導(dǎo)的CD4+和CD8+T細胞的黏附能力。