CD137L分子在多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞的表達(dá)及功能的研究.pdf

1、【目的】
　　(1)明確多發(fā)性骨髓瘤(MM)細(xì)胞表面CD137L分子的表達(dá)情況及臨床意義(2)探究CD137L分子在MM細(xì)胞表達(dá)的功能
　　【方法】
　　(1)采用密度梯度離心法分離MM患者骨髓液標(biāo)本單個(gè)核細(xì)胞(2)采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)骨髓瘤細(xì)胞/正常漿細(xì)胞表面CD137L分子的表達(dá)情況(3)應(yīng)用CD137L激活性抗體1F1活化CD137L逆信號(hào),采用細(xì)胞計(jì)數(shù)法、CCK8法及CFSE法觀察CD137L信號(hào)對(duì)U266細(xì)胞生

2、存及增殖的影響(4)PI單染法,檢測(cè)CD137L信號(hào)活化后細(xì)胞周期分布比例的變化(5)觀察硼替佐米對(duì)CD137L信號(hào)作用的影響。
　　【結(jié)果】
　　(1)正常漿細(xì)胞無CD137及CD137L分子表達(dá)(2)人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞株(U-266、RPMI8226、MY-5、KMS-11、LP-1)均組成性表達(dá)CD137L分子但無CD137表達(dá), CD137L分子表達(dá)的中位水平為78.7(57.9~98.9)％(3)127例原代細(xì)胞均

3、有CD137L分子表達(dá),中位水平為17.5(1~96.7)％(4)原代細(xì)胞不同細(xì)胞亞群CD137L分子的表達(dá)水平有差異, CD38++/+CD138+細(xì)胞的表達(dá)水平明顯低于 CD38+CD138+/CD38+CD138-細(xì)胞群體(P=0.00),與患者的臨床分型、分期無關(guān)(5)原代細(xì)胞表達(dá)CD137L分子的水平與患者的年齡、性別、分型、DS分期、起病時(shí)骨髓MM細(xì)胞百分比、血紅蛋白、白蛋白、球蛋白、血清LDH、血肌酐、血清鈣離子、堿性磷酸

4、酶、β2微球蛋白及M蛋白等臨床指標(biāo)無明顯相關(guān)性(6)原代細(xì)胞表達(dá)CD137L分子的水平與治療的關(guān)系是:治療后表達(dá)水平下降,初治時(shí)表達(dá)水平越低治療反應(yīng)越好,疾病復(fù)發(fā)時(shí)表達(dá)水平再次升高(7)體外實(shí)驗(yàn)部分通過細(xì)胞計(jì)數(shù)、CCK8及CFSE法證明:CD137L信號(hào)可促進(jìn)U-266細(xì)胞生長(zhǎng)(8)CD137L信號(hào)活化后U266細(xì)胞周期分布顯示處于細(xì)胞分裂前期的G1期細(xì)胞比例減少,處于細(xì)胞分裂期的S期細(xì)胞比例增多(9)CD137L信號(hào)誘導(dǎo)的促骨髓瘤細(xì)胞

5、增殖作用可被硼替佐米抑制
　　【結(jié)論】
　　CD137L分子在骨髓瘤細(xì)胞系、原代骨髓瘤細(xì)胞上組成性高表達(dá),但無CD137分子表達(dá),而正常漿細(xì)胞均無表達(dá);在骨髓瘤原代細(xì)胞上,相對(duì)幼稚的細(xì)胞CD137L分子的表達(dá)水平較高;CD137L分子的表達(dá)水平與患者的臨床和生物學(xué)特征無明顯相關(guān)性;CD137L分子的表達(dá)水平隨患者的治療反應(yīng)而下降,療效越好患者表達(dá)水平越低;體外實(shí)驗(yàn)中U-266細(xì)胞上的CD137L信號(hào)活化后,可誘導(dǎo)U-266細(xì)