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1、目的:以中醫(yī)絡(luò)病理論為指導(dǎo),以高蛋氨酸飲食建立大鼠血管內(nèi)皮功能障礙模型并作為參照,以力竭游泳建立過度疲勞模型,兩者疊加建立復(fù)合模型,通過觀察血管內(nèi)皮結(jié)構(gòu)與功能、腎素-血管緊張素系統(tǒng)、氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)的變化,探討力竭游泳所致過勞對(duì)血管內(nèi)皮功能的影響機(jī)制及通心絡(luò)的干預(yù)作用,為研究社會(huì)心理因素在血管病變中的作用及其防治提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:⑴將雄性Wistar大鼠隨機(jī)分組,以光鏡和透射電鏡技術(shù)觀察主動(dòng)脈形態(tài)變化、免疫組化技術(shù)檢測(cè)
2、內(nèi)皮素受體、內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達(dá)以及血液中內(nèi)皮素、一氧化氮的檢測(cè)分析血管內(nèi)皮功能。⑵實(shí)驗(yàn)結(jié)束后采集血液標(biāo)本,分別分離血漿和血清,檢測(cè)血漿腎素活性、血漿血管緊張素Ⅱ、血清中超氧化物歧化酶活性、主動(dòng)脈組織中AngⅡ、AngⅡ1型受體、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶Ⅰ及NADH/NADPH氧化酶亞單位p22phox的表達(dá)。
結(jié)果:①與正常對(duì)照組相比,高同型半胱氨酸組血漿PRA、AngⅡ有升高趨勢(shì),但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05);力竭游泳組、
3、復(fù)合模型組血漿PRA、AngⅡ均顯著升高(P<0.01,P<0.05);與高同型半胱氨酸組比較,復(fù)合模型組血漿中PRA、AngⅡ也明顯升高(P<0.01)。②與正常對(duì)照組比較,高同型半胱氨酸組、力竭游泳組、復(fù)合模型組MDA水平均明顯升高(P<0.05,P<0.01),血清SOD活性均顯著降低(P<0.05,P<0.01),p22phox陽性表達(dá)均不同程度增強(qiáng),以復(fù)合模型組陽性表達(dá)最強(qiáng)。③與正常對(duì)照組比較,復(fù)合模型組NO水平顯著降低(P<
4、0.01),ET含量明顯升高(P<0.01)。④與正常對(duì)照組比較,復(fù)合模型組血漿PRA、AngⅡ均升高(P<0.01,P<0.05)。⑤正常對(duì)照組大鼠主動(dòng)脈組織內(nèi)皮細(xì)胞幾乎未見AngⅡ、ACE、AT1R黃染陽性信號(hào)。⑥正常對(duì)照組主動(dòng)脈組織未見p22phox黃染陽性信號(hào),復(fù)合模型組可見p22phox較強(qiáng)黃染陽性信號(hào),兩用藥組可見p22phox黃染弱陽性信號(hào),并且以通心絡(luò)組變化明顯。
結(jié)論:⑴本研究以過勞等社會(huì)心理因素在血管病
5、變發(fā)生發(fā)展中的影響為背景,以高蛋氨酸飲食喂養(yǎng)大鼠造成血管內(nèi)皮損傷為參照,探討力竭游泳所致過勞對(duì)血管內(nèi)皮結(jié)構(gòu)與功能的影響,結(jié)果表明單純力竭游泳可使大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能出現(xiàn)明顯損傷,顯示力竭游泳所致過勞是引起血管內(nèi)皮損傷的重要危險(xiǎn)因素,力竭游泳與高蛋氨酸飲食疊加時(shí)可加重高蛋氨酸所致大鼠血管內(nèi)皮損傷。⑵探討力竭游泳對(duì)大鼠循環(huán)型RAS及組織型RAS的影響,發(fā)現(xiàn)力竭游泳可以激活大鼠循環(huán)型RAS,但對(duì)局部動(dòng)脈組織中的RAS影響不明顯;高蛋氨酸
6、飲食可使大鼠局部組織RAS激活,對(duì)循環(huán)型RAS影響不明顯;復(fù)合模型大鼠循環(huán)型和組織型的RAS均激活。揭示了力竭游泳可誘發(fā)大鼠循環(huán)型RAS過度激活并加重高蛋氨酸飲食引起的大鼠局部RAS激活。⑶力竭游泳引起模型大鼠RAS激活的同時(shí)氧化-抗氧化平衡失調(diào),這種變化在復(fù)合模型中進(jìn)一步加重,提示力竭游泳所致RAS激活與p22phox途徑激活引起的氧化應(yīng)激反應(yīng)相關(guān),這可能是力竭游泳所致過勞引起血管內(nèi)皮損傷的機(jī)制之一。⑷通心絡(luò)可通過降低復(fù)合模型大鼠血漿
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