慢性應(yīng)激誘發(fā)抑郁的多巴胺能神經(jīng)通路異常機(jī)制.pdf

1、目的:研究母愛(ài)剝奪應(yīng)激及慢性不可預(yù)知性應(yīng)激對(duì)大鼠行為及其多巴胺能中腦皮質(zhì)邊緣神經(jīng)通路內(nèi)多巴胺受體、轉(zhuǎn)運(yùn)體及腦源性營(yíng)養(yǎng)因子的影響，了解不同慢性應(yīng)激范式是否可誘發(fā)不同抑郁表型，并探討不同抑郁表型發(fā)生的多巴胺能中腦皮質(zhì)邊緣神經(jīng)通路機(jī)制。
　　方法:將新生SD大鼠按窩別隨機(jī)分入母愛(ài)剝奪應(yīng)激組（MD，n=8）、慢性不可預(yù)知性應(yīng)激組(CUPS，n=8)及對(duì)照組(C，n=8)。MD組大鼠在出生后接受母愛(ài)剝奪應(yīng)激，CUPS組大鼠10周齡起接受慢性

2、不可預(yù)知性應(yīng)激，C組大鼠不接受任何實(shí)驗(yàn)性處理。所有大鼠在13周齡時(shí)接受包括曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)、強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)及糖水偏愛(ài)實(shí)驗(yàn)的行為學(xué)評(píng)估，分別記錄大鼠在曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中的爬行總路程、直立次數(shù)、中央格比例及大便顆數(shù)，在強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中的靜止漂浮時(shí)間以及在糖水偏愛(ài)實(shí)驗(yàn)中的糖水偏愛(ài)率。于行為學(xué)評(píng)估結(jié)束后處死大鼠，收集其中腦腹側(cè)被蓋區(qū)(VTA)、前額葉皮質(zhì)、伏隔核、杏仁核、嗅球及紋狀體，采用實(shí)時(shí)定量熒光PCR技術(shù)及免疫印跡技術(shù)檢測(cè)三組大鼠上述腦區(qū)內(nèi)多巴胺受體（包括D

3、1樣受體:DRD1、DRD5及D2樣受體:DRD2、DRD3、DRD4）、轉(zhuǎn)運(yùn)體(DAT)及腦源性營(yíng)養(yǎng)因子（BDNF）的mRNA及蛋白水平。采用單因素方差分析或Kruskal-wallis H檢驗(yàn)及皮爾遜相關(guān)分析對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果:
　　1.行為學(xué)結(jié)果:(1)曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn):三組爬行總路程無(wú)差異;MD組與CUPS組的直立次數(shù)、大便顆數(shù)無(wú)差異，但均少于C組;MD組與C組的中央格比例無(wú)差異，但均高于CUPS組;(2)強(qiáng)迫游

4、泳實(shí)驗(yàn):CUPS組的靜止漂浮時(shí)間長(zhǎng)于MD組，且兩者均長(zhǎng)于C組;(3)糖水偏愛(ài)實(shí)驗(yàn):MD組的糖水偏愛(ài)率低于CUPS組，且兩者均低于C組。
　　2.蛋白檢測(cè)結(jié)果:(1)VTA:與C組比，MD組D1、D2樣受體、DAT及BDNF蛋白水平降低，CUPS組DRD2增高，DRD5、DRD4降低;與CUPS組比，MD組D1樣受體、DRD2、DRD3及BDNF降低。(2)前額葉皮質(zhì):與C組比，MD組D1樣受體、DRD3、DRD4及DAT蛋白水平增

5、高，BDNF降低，CUPS組的D1樣受體、DAT增高，DRD2、BDNF降低;與CUPS組比，MD組DRD3、DRD4增高，DRD5、DAT降低。(3)伏隔核:與C組比，MD組D1、D2樣受體及DAT的蛋白水平增高，BDNF降低，CUPS組D1、D2樣受體及DAT增高;與CUPS組比，MD組DAT增高，BDNF降低。(4)杏仁核:與C組比，MD組D1、D2樣受體的蛋白水平增高，CUPS組DRD5、D2樣受體及DAT增高;與CUPS組比，

6、MD組DRD1增高，DRD4、DAT降低。(5)嗅球:與C組比，MD組D1、D2樣受體及DAT的蛋白水平增高，CUPS組DRD1、DRD2增高。(6)紋狀體:與C組比，MD組DRD5、D2樣受體及DAT的蛋白水平增高，DRD1降低，CUPS組DRD5、DRD2、DRD3、DAT及BDNF增高，DRD1降低。
　　3.mRNA檢測(cè)結(jié)果:除下列指標(biāo)外，其余指標(biāo)組間比較同蛋白水平檢測(cè)結(jié)果。MD組VTA內(nèi)DRD1高于C組，MD組及CUPS

7、組前額葉皮質(zhì)及伏隔核內(nèi)BDNF均高于C組;
　　4.行為學(xué)與生物學(xué)指標(biāo)的相關(guān)分析結(jié)果:(1)大鼠曠場(chǎng)試驗(yàn)中的直立次數(shù)與其VTA內(nèi)DRD5、DRD3、DRD4及其紋狀體DRD1的蛋白水平呈正相關(guān)，與其紋狀體內(nèi)D2樣受體、DAT及前額葉皮質(zhì)內(nèi)DRD5、DAT的蛋白水平呈負(fù)相關(guān);(2)大鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中的靜止漂浮時(shí)間與其杏仁核內(nèi)D2樣受體、DAT及前額葉皮質(zhì)內(nèi)DRD1、DRD5、DAT的蛋白水平呈正相關(guān);(3)大鼠糖水偏愛(ài)實(shí)驗(yàn)中的糖水偏

8、愛(ài)率與其VTA內(nèi)DRD5、DRD3、DAT的蛋白水平呈正相關(guān)，與其伏隔核內(nèi)D2樣受體、DAT及嗅球內(nèi)D1、D2樣受體、DAT的蛋白水平呈負(fù)相關(guān)。
　　結(jié)論:
　　1.不同慢性應(yīng)激可誘發(fā)大鼠不同抑郁表型。
　　2.不同慢性應(yīng)激對(duì)大鼠多巴胺能中腦皮質(zhì)邊緣神經(jīng)通路內(nèi)D1、D2樣多巴胺受體及DAT基因表達(dá)的影響不同。
　　3.不同抑郁樣行為涉及不同的多巴胺能神經(jīng)通路異常機(jī)制。
　　4.不同慢性應(yīng)激對(duì)大鼠多巴胺能中腦