小鼠銅蓄積性毒性試驗(yàn)及其殘留分析研究.pdf

1、本研究針對(duì)國(guó)內(nèi)飼料生產(chǎn)商及養(yǎng)殖業(yè)濫用銅的實(shí)際情況，以KM種小鼠作為動(dòng)物模型，采用灌胃方式染銅，進(jìn)行30d蓄積性毒性試驗(yàn)和殘留消除試驗(yàn)。通過(guò)系統(tǒng)研究銅對(duì)小鼠生產(chǎn)性能，生理功能，組織銅、血銅殘留的影響及銅在小鼠組織、血液中的殘留消除規(guī)律，為生產(chǎn)無(wú)公害肉制品及其副產(chǎn)品和食品監(jiān)督部門提供一個(gè)可靠的參考依據(jù)。 將108只KM種小鼠按體重隨機(jī)分為兩批。 第一批48只小鼠按體重隨機(jī)分為對(duì)照、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ4個(gè)處理組，每個(gè)處理組12只小鼠，

2、雌雄各半，分籠飼養(yǎng)。以硫酸銅(CuSO4·5H2O)作為銅源，采用灌胃方式染銅，以小鼠體重計(jì)，3個(gè)染銅組分別按10mg/kg、20mg/kg、40mg/kg劑量濃度梯度遞增灌胃，對(duì)照組灌胃等量生理鹽水，進(jìn)行30d蓄積性毒性試驗(yàn)。試驗(yàn)過(guò)程中測(cè)定小鼠的生長(zhǎng)性能，每10d尾靜脈采血進(jìn)行白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)，30d后處死小鼠進(jìn)行剖解觀察，器官組織病理學(xué)觀察，計(jì)算臟器指數(shù)，測(cè)定血液生化指標(biāo)及組織(肝臟、腎臟、肌肉)、血液中銅的殘留量。 第二批6

3、0只小鼠按體重隨機(jī)分為5個(gè)處理組，每組12只，雌雄各半，分籠飼養(yǎng)。其中1組設(shè)為對(duì)照組，剩下4組按每日20mg/kg體重的劑量灌胃染銅，對(duì)照組灌胃等量生理鹽水，連續(xù)10d。按預(yù)定采樣方案，于染銅10d后0.25h～16d將小鼠處死采樣，分別測(cè)定分析銅在小鼠肝臟、腎臟、肌肉、血液中的殘留消除規(guī)律。 結(jié)果表明：1.10mg/kg銅水平對(duì)小鼠的生產(chǎn)性能有明顯的改善作用，該劑量組小鼠全期凈增重14.84g/只(對(duì)照組11.20g/只)，全

4、期增重率66.10％(對(duì)照組49.78％)，全期采食量151.08g/只(對(duì)照組135.19g/只)，全期料體比10.18(對(duì)照組12.07)。20mg/kg和40mg/kg銅水平則降低了小鼠的生長(zhǎng)性能。 2.10mg/kg、20mg/kg、40mg/kg銅水平對(duì)小鼠血液中淋巴細(xì)胞和中性粒細(xì)胞所占白細(xì)胞比例均有顯著影響，造成淋巴細(xì)胞比例的顯著下降，中性粒細(xì)胞比例的顯著上升。小鼠血清谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和乳酸

5、脫氫酶(LDH)活性隨染銅劑量的增加而升高；10mg/kg和20mg/kg銅水平能顯著提高堿性磷酸酶(AKP)的活性，40mg/kg銅水平則不利于該酶活性的發(fā)揮。 3.10mg/kg、20mg/kg、40mg/kg銅水平對(duì)小鼠心臟、肝臟、脾臟、腎臟等器官組織均造成了不同程度的損傷，且損害程度和染銅劑量呈正相關(guān)。肝臟，腎臟是銅對(duì)小鼠毒性損傷的主要靶器官。 4.肝臟和腎臟是銅殘留的主要器官，染銅劑量與肝銅、腎銅含量呈良好正相

6、關(guān)。10mg/kg劑量組肝銅、腎銅含量高于對(duì)照組，但差異不顯著；20mg/kg、40mg/kg劑量組肝銅、腎銅均顯著(p＜0.05)或極顯著(p＜0.01)高于對(duì)照組。20mg/kg、40mg/kg劑量組的肝銅含量和40mg/kg劑量組的腎銅含量均高于我國(guó)肉類食品銅最高殘留限量10mg/kg的規(guī)定。肌銅含量和血銅含量隨染銅劑量增加變化相對(duì)穩(wěn)定。 5.銅在血液中的代謝時(shí)間短，經(jīng)過(guò)4h左右代謝至正常水平；在肝臟和腎臟的代謝時(shí)間相對(duì)較