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文檔簡介
1、辣椒疫病是一種傳播范圍廣,危害性大的世界性土傳病害,其病原Phytophthoracapsici自從1922年被Leon Leonian首次確定之后,在世界各地均有發(fā)現(xiàn)。辣椒疫霉在生物分類學(xué)中屬于卵菌門,卵菌綱,霜霉目,霜霉科,疫霉屬,它主要侵染葫蘆科、豆科、茄科、十字花科等四科約10個屬的作物。辣椒疫霉對世界農(nóng)業(yè)特別是辣椒生產(chǎn)造成了巨大的損失。辣椒疫病常規(guī)防治方法以施用農(nóng)藥為主,極大程度的破壞了生態(tài)環(huán)境。因此通過探索辣椒疫霉侵染機(jī)制研
2、發(fā)新的防治方法迫在眉睫。
RxLR效應(yīng)因子是指含有RxLR-DEER結(jié)構(gòu)域,在辣椒疫霉侵染寄主時能進(jìn)入寄主細(xì)胞,抑止寄主的防衛(wèi)反應(yīng),從而有利于辣椒疫霉侵入與擴(kuò)展的一類蛋白。為了從蛋白三維結(jié)構(gòu)角度闡述RxLR效應(yīng)因子作用機(jī)制,本研究克隆出多個RxLR效應(yīng)因子基因,對其進(jìn)行了原核表達(dá),得到高表達(dá)量的重組菌株,并對表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行純化,然后用純化后的蛋白進(jìn)行蛋白結(jié)晶條件的篩選實驗,目的是得到分辨率在3(A)以上的RxLR蛋白晶體用以進(jìn)行
3、RxLR效應(yīng)因子三維結(jié)構(gòu)的解析。主要結(jié)果如下:
1、本研究克隆了20多個RxLR效應(yīng)因子基因,這些基因翻譯的氨基酸序列都具有RxLR效應(yīng)因子的結(jié)構(gòu)域。
2、本研究嘗試多種方法對表達(dá)的目的蛋白進(jìn)行純化條件的摸索,其中編碼為129044效應(yīng)因子蛋白較穩(wěn)定,獲得了濃度大于10mg/ml,純度在95%以上的129044蛋白。
3、本研究對純化好的129044蛋白進(jìn)行了晶體生長條件的篩選,得到了質(zhì)量較好的蛋白晶體,在
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