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1、目的:應(yīng)用不同的抗體蛋白研究小鼠腸道缺血/再灌注致遠(yuǎn)隔組織損傷時(shí),TLR4-HMGB1及其下游信號(hào)途徑的作用。
方法:SPF級(jí)雄性C57BL/6小鼠40只,隨機(jī)分為5組:sham、control、anti-HMGB1、anti-MyD88和anti-TRIF,每組8只。Control、anti-HMGB1、anti-MyD88和anti-TRIF組在行腸道缺血/再灌注手術(shù)前30min分別經(jīng)尾靜脈注射對(duì)照IgG、HMGB1、My
2、D88和TRIF抗體(劑量為1mg/kg,濃度為0.025%)。所有小鼠麻醉,開腹后,鈍性分離暴露腸系膜上動(dòng)脈(superior mesenteric artery,SMA)。除sham組外的四組用無(wú)創(chuàng)血管夾夾閉腸系膜上動(dòng)脈60min后松夾再灌注60min,sham組只開腹120min,不進(jìn)行缺血再灌注。術(shù)后取材,檢測(cè)血漿NF-κB p65、IL-6及TNF-α濃度;肺臟和肝臟MPO的活性;肺和腸道組織形態(tài)學(xué)變化和HMGB1與NF-κB
3、的mRNA和蛋白表達(dá)。應(yīng)用單因素方差分析檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
結(jié)果:在小鼠腸道缺血再灌注損傷中,與對(duì)照組比較,在缺血前通過(guò)注射抗體阻斷HMGB1、MyD88和TRIF的表達(dá)能明顯的降低血漿炎癥因子NF-κB、IL-6及TNF-α的水平,同時(shí)減輕了肺臟和小腸組織的損傷。anti-HMGB1抗體、anti-MyD88抗體和anti-TRIF抗體的應(yīng)用能明顯的減輕缺血再灌注引起的組織損傷,提示了其治療性的作用,其中anti-HMGB
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