清熱化瘀Ⅱ號(hào)方對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷TLR4和TRIF mRNA表達(dá)的影響.pdf

1、目的:通過(guò)觀察清熱化瘀 II號(hào)方對(duì)腦缺血再灌注損傷大鼠腦內(nèi)Toll樣受體4(TLR4)和TIR結(jié)構(gòu)域銜接蛋白(TRIF)mRNA表達(dá)的影響,探討清熱化瘀 II號(hào)方對(duì)防治腦缺血性再灌注損傷的作用機(jī)制,為其臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù),并為中醫(yī)藥防治腦血管病提供思路借鑒。
　　方法:將成年SD大鼠192只(雌雄各半),隨機(jī)分為兩大組,每組96只再隨機(jī)分為四組,即空白對(duì)照組(A組):6只,假手術(shù)組(B組):30只,模型組(C組):30只,清熱化

2、瘀II號(hào)方組(D組):30只。B、C、D每組按照缺血2h后再灌注3h、6h、12h、24h、48h五個(gè)時(shí)間點(diǎn)分為5個(gè)亞組( n=6),并分別作如下處理:A組正常飼養(yǎng),自由飲食。B組線栓只插入頸內(nèi)動(dòng)脈9mm,術(shù)后正常飼養(yǎng),灌胃生理鹽水。C組生理鹽水灌胃7d后行MCAO2h,缺血再灌注后按各個(gè)時(shí)間點(diǎn)將動(dòng)物完全處死。D組予清熱化瘀II號(hào)方灌胃7d,術(shù)后繼續(xù)灌胃給藥,余操作方法與C組相同。取材后將一組腦組織行常規(guī)HE染色并在光學(xué)顯微鏡下觀察其病

3、理形態(tài)學(xué)改變。另一大組取材后采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法觀察各個(gè)時(shí)間點(diǎn)TLR4、TRIF mRNA的表達(dá)變化。
　　結(jié)果:(1)清熱化瘀II號(hào)方能改善大鼠腦神經(jīng)功能缺損癥狀,D組行為評(píng)分與C組相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。(2)HE染色結(jié)果:光鏡下觀察A組與B組均未見(jiàn)神經(jīng)元損傷,D組與C組的腦組織病理形態(tài)學(xué)比較,在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)神經(jīng)元受損明顯減輕。(3)熒光定量PCR反應(yīng)結(jié)果:①TLR4、TRIF mRNA在A組B組均有少量表達(dá)

4、,其組間無(wú)明顯差異( P>0.05);C組缺血各時(shí)間點(diǎn)其表達(dá)含量較其他組均明顯增多(P<0.05)。②C組大鼠隨再灌注時(shí)間的延長(zhǎng)TLR4、TRIFmRNA的表達(dá)含量逐漸升高,腦缺血再灌注24h后其mRNA表達(dá)達(dá)高峰,48h后開(kāi)始下降;D組較 C組各時(shí)間點(diǎn)其表達(dá)含量顯著降低,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　結(jié)論:清熱化瘀II號(hào)方可促進(jìn)腦缺血再灌注損傷后的神經(jīng)功能恢復(fù),其作用機(jī)制可能與通過(guò)降低TLR4和TRIF的表達(dá)以減少神