氯喹對(duì)大鼠全腦缺血再灌注損傷的作用及對(duì)TLR3和其下游蛋白表達(dá)的影響.pdf

1、目的：探討氯喹在大鼠全腦缺血再灌注(ischemic/reperfusion injury I/R)損傷中的作用，并觀察在該模型中氯喹對(duì)TLR3及其下游蛋白干擾素調(diào)節(jié)因子3(interferon regulator factor3，IRF3)、β干擾素(interferonβ IFN-β)表達(dá)的影響，以初步探討氯喹在腦缺血再灌注損傷中的作用機(jī)制。
　　方法：將成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠(250g-300g)隨

2、機(jī)分為三組：假手術(shù)組、缺血損傷組及氯喹處理組。每組20只。用Pulsinelli-Brierley四血管阻斷方法制作大鼠全腦缺血再灌注損傷模型。于建模后72h對(duì)各組大鼠進(jìn)行以下檢測(cè)，(1)H-E染色法觀察大鼠海馬的神經(jīng)元壞死情況；(2)使用Y型電迷宮檢測(cè)各組大鼠學(xué)習(xí)記憶能力；(3)采用Western-Blot法測(cè)定TLR3、IRF3與IFN-β的蛋白表達(dá)變化；(4)采用逆轉(zhuǎn)錄-多聚酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法檢測(cè)大鼠海馬TLR3mRNA、

3、IRF3mRNA與IFN-βmRNA表達(dá)情況；統(tǒng)計(jì)學(xué)分析各組之間比較采用單因素方差分析，組內(nèi)兩兩比較采用SNK檢驗(yàn)。
　　結(jié)果：1.HE結(jié)果顯示：假手術(shù)組大鼠海馬CA1區(qū)細(xì)胞整體排列整齊緊密，少見壞死細(xì)胞；缺血損傷組及氯喹處理組大鼠鏡下觀察均見細(xì)胞排列雜亂并多見典型壞死神經(jīng)元，且氯喹處理組大鼠細(xì)胞整體排列情況較缺血損傷組大鼠規(guī)整，細(xì)胞整體結(jié)構(gòu)亦比缺血損傷組大鼠完整。
　　2.行為學(xué)檢測(cè)結(jié)果：三組大鼠相比，假手術(shù)組大鼠達(dá)標(biāo)所用

4、次數(shù)最少，缺血損傷組與氯喹處理組大鼠及假手術(shù)組大鼠相比所用次數(shù)均增多，而氯喹處理組和缺血損傷組相比大鼠達(dá)標(biāo)所用次數(shù)少，各組之間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(P<0.05)
　　3.Western blot結(jié)果顯示：假手術(shù)組TLR3、IRF3與IFN-β蛋白均有少量表達(dá)，與假手術(shù)組相比，缺血損傷組與氯喹處理組大鼠TLR3、IRF3與TFN-β三者蛋白表達(dá)均升高，但氯喹處理組與缺血損傷組相比三者表達(dá)均下降，各組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(P<0.0

5、5)
　　4.RT-PCR結(jié)果顯示：假手術(shù)組TLR3mRNA、IRF3mRNA與IFN-βmRNA有少量表達(dá)，與假手術(shù)組相比，缺血損傷組與氯喹處理組大鼠TFLR3、IRF3與IFN-β三者mRNA表達(dá)均升高，但氯喹處理組與缺血損傷組大鼠相比三者mRNA表達(dá)均下降，(P<0.05)。
　　結(jié)論：1.氯喹可以減輕腦缺血再灌注損傷，并可改善缺血后學(xué)習(xí)記憶能力。2.氯喹可能通過(guò)部分下調(diào)TLR3及其下游蛋白IRF3及IFN-β表達(dá)作用