遠(yuǎn)隔缺血后適應(yīng)(RIPostC)對(duì)心肌缺血再灌注損傷的作用及機(jī)制研究.pdf

1、第一部分 RIPostC對(duì)STEMI患者心肌缺血再灌注損傷的臨床研究
　　目的：探討肢體遠(yuǎn)隔缺血后適應(yīng)（Remote ischemic postconditioning，RIPostC）對(duì)急性ST段抬高性心肌梗死(ST-Segment Elevation Myocardial Infarction，STEMI)患者心肌缺血再灌注損傷的影響；探討RIPostC對(duì)STEMI患者腎功能的保護(hù)作用。
　　方法：研究對(duì)象為蘇州大學(xué)附屬

2、第一醫(yī)院2014年10月-2015年6月確診為STEMI并在心導(dǎo)管室行急診直接經(jīng)皮冠脈介入治療(Primary Percutaneous Coronary Intervention，PPCI)患者共80人。隨機(jī)分為遠(yuǎn)隔缺血后適應(yīng)組（PPCI+RIPostC組：n=36）和對(duì)照組（PPCI組：n=44），兩組均接受PPCI。遠(yuǎn)隔缺血后適應(yīng)組在球囊擴(kuò)張3分鐘內(nèi)針對(duì)上肢行RIPostC。受試者術(shù)前和術(shù)后0.5、8、24、48、72小時(shí)共抽取靜

3、脈血6次測(cè)定血清肌酸磷酸激酶同工酶(creatine kinase-MB，CK-MB)、一氧化氮(nitric oxide，NO)、血清基質(zhì)衍生因子-1α（stromal cell-derived factor-1alpha，SDF-1α）濃度。術(shù)前、術(shù)后24小時(shí)、術(shù)后72小時(shí)分別抽取靜脈血各3次測(cè)定血清尿素氮（blood urea nitrogen，BUN）、肌酐（serum creatinine，SCr）水平，計(jì)算急性腎功能損傷（A

4、cute kidney injury，AKI）發(fā)生率以及腎小球?yàn)V過(guò)率（estimated glomerular filtration rate，eGFR）。術(shù)后第7天應(yīng)用心臟超聲評(píng)估左心室射血分?jǐn)?shù)(Left ventricular ejection fraction，LVEF)以及室壁運(yùn)動(dòng)計(jì)分指數(shù)(wall motion score index，WMSI)。
　　結(jié)果：
　　1.兩組在年齡、性別、危險(xiǎn)因素、入院時(shí)生命體征、缺

5、血時(shí)間、冠脈病變情況、應(yīng)用造影劑、植入支架情況等方面均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　2.遠(yuǎn)隔缺血后適應(yīng)組相較對(duì)照組術(shù)后CK-MB峰值明顯減低（280.60±45.83 ng/ml VS352.21±65.42 ng/ml，P<0.01）。遠(yuǎn)隔缺血后適應(yīng)組CK-MB曲線(xiàn)下面積中位數(shù)為717.25[364.63-921.98]，對(duì)照組曲線(xiàn)下面積中位數(shù)為807.00[693.30-1136.00]，遠(yuǎn)隔缺血后適應(yīng)組較對(duì)照組CK-MB曲線(xiàn)下面積明顯

6、減低（P=0.02）。
　　3.兩組共22例(27.5％)患者發(fā)生AKI，遠(yuǎn)隔缺血后適應(yīng)組4例（11.1%），對(duì)照組18例（40.9%），遠(yuǎn)隔缺血后適應(yīng)組較對(duì)照組AKI發(fā)生率明顯減低（11.1%VS40.9%，P<0.01)。遠(yuǎn)隔缺血后適應(yīng)組及對(duì)照組術(shù)前 eGFR無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（102.26±18.33 ml/min/1.73m2 VS100.34±12.86ml/min/1.73m2，P=0.60)；術(shù)后eGFR遠(yuǎn)隔缺血后適應(yīng)組顯

7、著高于對(duì)照組（98.72±13.34ml/min/1.73m2 VS78.13±12.40ml/min/1.73m2，P<0.01)；術(shù)前與術(shù)后eGFR差值（ΔeGFR）遠(yuǎn)隔缺血后適應(yīng)組顯著低于對(duì)照組(-3.54±14.45 ml/min/1.73m2 VS-22.21±12.46ml/min/1.73m2，P<0.01）。
　　4.兩組應(yīng)用各時(shí)間點(diǎn)血清NO濃度繪制曲線(xiàn)，計(jì)算出曲線(xiàn)下面積。遠(yuǎn)隔缺血后適應(yīng)組中位數(shù)為5.826[3.9

8、23-13.172]，對(duì)照組中位數(shù)為4.936[3.296-6.141]，遠(yuǎn)隔缺血后適應(yīng)組顯著高于對(duì)照組（P=0.048）。
　　5.兩組應(yīng)用各時(shí)間點(diǎn)血清SDF-1α濃度繪制曲線(xiàn)，計(jì)算出曲線(xiàn)下面積。遠(yuǎn)隔缺血后適應(yīng)組中位數(shù)為410.800[314.200-629.000]，對(duì)照組為351.000[257.600-478.900]，遠(yuǎn)隔缺血后適應(yīng)組顯著高于對(duì)照組（P=0.044）。
　　6.兩組術(shù)后應(yīng)用心臟超聲評(píng)估LVEF，遠(yuǎn)隔

9、缺血后適應(yīng)組LVEF顯著高于對(duì)照組（54.50±9.73%VS48.14±7.04%，P=0.01）。遠(yuǎn)隔缺血后適應(yīng)組和對(duì)照組WMSI評(píng)分中位數(shù)分別為2分、3分，遠(yuǎn)隔缺血后適應(yīng)組患者WMSI評(píng)分顯著低于對(duì)照組（P=0.02）。
　　結(jié)論：1.針對(duì)上肢行RIPostC可以降低STEMI患者心肌壞死面積、提高患者LVEF，提示RIPostC對(duì)STEMI患者心肌缺血再灌注損傷有保護(hù)作用。2.上肢RIPostC可以降低STEMI患者AKI

10、發(fā)病率，減少eGFR下降程度，對(duì)STEMI患者腎功能有保護(hù)作用。3.上肢RIPostC可升高STEMI患者術(shù)后血清NO以及SDF-1α水平。
　　第二部分 RIPostC對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的基礎(chǔ)研究
　　目的：探討SDF-1α對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的影響。并探討SDF-1α受體CXCR4拮抗劑（AMD3100）對(duì)RIPostC作用的影響，進(jìn)而探討RIPostC減輕心肌缺血再灌注損傷的潛在機(jī)制。
　　方法：

11、>　　第一節(jié)研究對(duì)象為雄性SD大鼠30只，隨機(jī)分成3組：缺血再灌注組（I/R組）、SDF-1α組、假手術(shù)組（sham組）。I/R組：結(jié)扎左前降支30分鐘，再灌注120分鐘，再次開(kāi)通前降支時(shí)在梗死心肌邊緣5個(gè)部位注射5μL磷酸緩沖鹽溶液(PBS)；SDF-1α組:結(jié)扎左前降支30分鐘，再灌注120分鐘，再次開(kāi)通前降支實(shí)現(xiàn)再灌注同時(shí)，在梗死心肌邊緣5個(gè)部位注射5μL濃度為60 ng/μL的重組鼠SDF-1α蛋白。假手術(shù)組：重復(fù)以上所述手術(shù)過(guò)

12、程但是不對(duì)冠狀動(dòng)脈做任何干預(yù)。
　　第二節(jié)研究對(duì)象為雄性SD大鼠40只，隨機(jī)分成4組：缺血再灌注（I/R）組、RIPostC組、RIPostC+AMD3100、假手術(shù)組（sham組）。I/R組：結(jié)扎左前降支30分鐘，再灌注120分鐘；3. RIPost組：結(jié)扎左前降支30分鐘，再灌注120分鐘，再次開(kāi)通前降支同時(shí)，應(yīng)用紗布繃帶在大鼠下肢扎緊5分鐘，松開(kāi)5分鐘，重復(fù)3個(gè)循環(huán)，應(yīng)用超聲明確在扎緊時(shí)動(dòng)脈血流完全阻斷。在缺血10分鐘前，腹

13、腔予以注射PBS。RIPostC+AMD3100組：在缺血10分鐘前，應(yīng)用AMD3100（10μg/kg）給予大鼠腹腔注射,余同RIPost組。假手術(shù)組：重復(fù)以上所述手術(shù)過(guò)程但是不對(duì)冠狀動(dòng)脈做任何干預(yù)。
　　兩節(jié)研究均對(duì)大鼠心肌進(jìn)行TTC-evans藍(lán)染色，并計(jì)算心肌壞死面積。
　　結(jié)果：第一節(jié)：SDF-1α組相較I/R組心肌壞死面積明顯減低（40.61±7.23%VS56.33±5.11%，P<0.01）；第二節(jié)：RIPo

14、stC組較I/R組心肌壞死面積明顯減低（38.41±4.52%VS55.65±8.49%，P<0.01）；RIPostC組較RIPostC+AMD3100組心肌壞死面積明顯減低（38.41±4.52%VS57.32±7.23%，P<0.01）；運(yùn)用AMD3100后，RIPostC+AMD3100組與I/R組相比，心肌壞死面積無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.60）。
　　結(jié)論：1.對(duì)SD大鼠下肢行RIPostC可以有效降低心肌壞死面積，減輕心