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文檔簡(jiǎn)介
1、第一部分:不同濃度七氟醚處理對(duì)老年大鼠認(rèn)知功能的影響
目的:觀察老年SD大鼠吸入不同濃度的七氟醚后,對(duì)認(rèn)知功能的影響。
方法:將18月齡的清潔級(jí)健康雄性SD大鼠80只,體重490~590 g。按照數(shù)字表法隨機(jī)劃分為以下幾組(每組各16只):0%七氟醚吸入組(C組)、1%七氟醚吸入組(S1組)、2%七氟醚吸入組(S2組)、3%七氟醚吸入組(S3組)、4%七氟醚吸入組(S4組)。各組分別給予不同濃度七氟醚吸入6h
2、。七氟醚吸入后24h,在各組中隨機(jī)抽取8只老年大鼠在冰上斷頭取海馬,分別使用WESTERN BLOT法及酶聯(lián)接免疫吸附法測(cè)定海馬內(nèi)BACE-1(Human Beta-Site APP-Cleaving Enzyme-1)、β淀粉樣蛋白(Aβ)以及β-淀粉樣前體蛋白(APP)的表達(dá)。剩余老年大鼠行Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)對(duì)老年大鼠的行為學(xué)進(jìn)行評(píng)價(jià)。結(jié)果:1.Morris水迷宮顯示:老年大鼠在進(jìn)行定位航行實(shí)驗(yàn)和空間探索實(shí)驗(yàn)中,S3、S4組老年
3、大鼠與C組比較,穿越平臺(tái)象限的次數(shù)減少及逃避潛伏期明顯延長(zhǎng),而S1、S2組老年大鼠與C組相比,平臺(tái)穿越次數(shù)及逃避潛伏期則無(wú)統(tǒng)計(jì)差異。2.酶聯(lián)免疫吸附法結(jié)果顯示:各組老年大鼠海馬APP、Aβ表達(dá)與C組比較均增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而隨著吸入七氟醚濃度的增加各組老年大鼠海馬內(nèi)APP、Aβ表達(dá)亦逐漸增加,且各組間差異據(jù)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.WESTERN BLOT結(jié)果顯示:S3、S4組與C組比較,老年大鼠海馬內(nèi)BACE-1的表達(dá)顯著增高。而其余各
4、組間比較,老年大鼠海馬內(nèi)BACE-1表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:1.七氟醚吸入對(duì)老年大鼠認(rèn)知功能的影響具有濃度依賴性,其高濃度七氟醚(大于3%)吸入麻醉后對(duì)認(rèn)知功能的影響更為明顯。2.高濃度七氟醚對(duì)認(rèn)知功能的影響機(jī)制,可能是通過(guò)誘導(dǎo)APP、Aβ的生成,從而進(jìn)一步誘發(fā)BACE-1表達(dá)上調(diào)而發(fā)揮作用。
第二部分:姜黃素對(duì)高濃度七氟醚所致老年大鼠認(rèn)知功能損害的干預(yù)
目的:觀察姜黃素對(duì)吸入高濃度七氟醚所致老年大鼠學(xué)習(xí)
5、記憶能力改變的干預(yù)效應(yīng)及對(duì)環(huán)氧合酶二(COX-2)表達(dá)的影響。
方法:將18月齡的清潔級(jí)健康雄性SD大鼠48只,體重500~600 g。按照數(shù)字表法隨機(jī)分為3組:分別為姜黃素組(H+F組,n=16);七氟醚對(duì)照組(F組,n=16);空白對(duì)照組(C組,n=16)。姜黃素組、七氟醚組和對(duì)照組老年大鼠分別吸入3%七氟醚6h或純氧6h后,分別連續(xù)注射溶于二甲基亞砜的姜黃素或單純二甲基亞砜七天,采用Morris水迷宮對(duì)老年大鼠進(jìn)行行
6、為學(xué)測(cè)試。同時(shí)取老年大鼠在冰上斷頭取海馬,分別使用WESTERN BLOT法及酶聯(lián)接免疫吸附法測(cè)定海馬內(nèi)環(huán)氧化酶-2(COX-2)、BACE-1以及β淀粉樣蛋白。
結(jié)果:1.Morris水迷宮測(cè)試顯示:(H+F)組、F組的老年大與空白對(duì)照組比較,穿越平臺(tái)象限的次數(shù)減少及平均逃避潛伏期延長(zhǎng),而F組與(H+F)組比較,穿越平臺(tái)象限的次數(shù)亦減少,而平均逃避潛伏期延長(zhǎng)卻無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2.ELISA結(jié)果顯示:F組的Aβ表達(dá)明顯高于(
7、H+F)組及C組,而(H+F)組與C組比較Aβ的表達(dá)也增高。3.WESTERN BLOT結(jié)果顯示:F組及(H+F)組BACE-1的表達(dá)高于C組。4.F組及(H+F)組大鼠海馬中COX-2的表達(dá)與C組比較無(wú)顯著增高。結(jié)論:姜黃素有助于改善高濃度七氟醚吸入所致老年大鼠學(xué)習(xí)學(xué)習(xí)記憶能力的損害,其機(jī)制可能與下調(diào)BACE-1表達(dá),抑制高濃度七氟醚誘導(dǎo)Aβ的生成有關(guān);而COX-2的表達(dá)與之關(guān)系不大。
結(jié)論:
1.七氟醚與
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