電針預(yù)處理對(duì)七氟醚誘發(fā)老齡大鼠認(rèn)知功能障礙的影響.pdf

1、目的:術(shù)后認(rèn)知功能障礙(postoperative cognitive dysfunction，POCD)是老年患者麻醉手術(shù)后常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥之一。研究證實(shí)電針刺激療法可緩解缺血再灌注腦損傷和阿爾茨海默病相關(guān)的認(rèn)知功能下降，而電針預(yù)處理對(duì)老年患者術(shù)后認(rèn)知功能障礙的影響尚未見報(bào)道。凋亡是神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育過程中清除多余和損傷神經(jīng)元的生理過程，其中不受控制的凋亡可能與多種神經(jīng)退行性疾病和中風(fēng)的發(fā)生關(guān)系密切。神經(jīng)元凋亡途徑包括線粒體凋亡途徑

2、、膜受體途徑和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激途徑等，線粒體凋亡途徑是否參與POCD的發(fā)病及電針預(yù)處理的神經(jīng)保護(hù)作用過程尚不清楚。本研究擬評(píng)價(jià)電針預(yù)處理對(duì)七氟醚誘發(fā)老齡認(rèn)知功能障礙的影響，為臨床提供參考。
　　方法:健康雄性SD大鼠150只，18～20月齡，體重為550～600 g，采用隨機(jī)數(shù)字表法，將其隨機(jī)分為3組（n=50）:對(duì)照組（C組）、七氟醚麻醉組（S組）和電針預(yù)處理組(EA組)。C組于相同環(huán)境下吸入100％氧氣4h，EA組于七氟醚麻醉前5天

3、時(shí)開始電針刺激百會(huì)穴、大椎穴和足三里30 min，選用疏密波，頻率2Hz/15Hz，強(qiáng)度1mA，以大鼠胡須輕微抖動(dòng)為電針刺激百會(huì)穴、大椎穴有效的標(biāo)志，以大鼠后肢輕度抖動(dòng)為電針刺激足三里有效的標(biāo)志，1次/d，連續(xù)5d。電針處理結(jié)束后24 h時(shí)S組和EA組于有機(jī)玻璃麻醉箱中吸入3％七氟醚4h。每組隨機(jī)取10只大鼠，于七氟醚麻醉結(jié)束后即刻行動(dòng)脈血?dú)夥治?每組選取10只大鼠，于麻醉結(jié)束后1d時(shí)行Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)大鼠認(rèn)知功能，連續(xù)6d;

4、于麻醉結(jié)束后第1、6d時(shí)，隨機(jī)取10只大鼠，斷頭取海馬組織，采用流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定海馬神經(jīng)元線粒體膜電位(MMP)和海馬神經(jīng)元凋亡率，采用Western blot法測(cè)定海馬神經(jīng)元胞漿細(xì)胞色素c(Cyt c)和活化caspase-3的表達(dá)，于透射電子顯微鏡下觀察大鼠海馬神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)的病理學(xué)改變（線粒體、胞漿、胞核、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及高爾基體）。
　　結(jié)果:3組大鼠動(dòng)脈血?dú)夥治龈髦笜?biāo)均在正常范圍內(nèi)，組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

5、>　　與C組比較，S組和EA組大鼠逃避潛伏期延長(zhǎng)，穿越原平臺(tái)次數(shù)、平臺(tái)所在象限停留時(shí)間比例減少(P＜0.05），海馬神經(jīng)元凋亡率增加、MMP降低，胞漿Cyt c和活化的caspase-3表達(dá)上調(diào)(P＜0.05)。
　　與S組比較，EA組大鼠逃避潛伏期縮短，穿越原平臺(tái)次數(shù)增加，平臺(tái)所在象限停留時(shí)間比例增加（P＜0.05），海馬神經(jīng)元凋亡率降低，MMP增高，而海馬神經(jīng)元胞漿Cyt c和活化的caspase-3表達(dá)下調(diào)(P＜0.05)。

6、
　　電鏡下C組大鼠各時(shí)點(diǎn)海馬神經(jīng)元各細(xì)胞器結(jié)構(gòu)等未見明顯異常;S組大鼠麻醉后第1天時(shí)，海馬神經(jīng)元明顯水腫，細(xì)胞核皺縮，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)脫顆粒，線粒體嵴內(nèi)外膜融合，出現(xiàn)空泡化;麻醉后第7天時(shí)，海馬神經(jīng)元胞質(zhì)水腫減輕，胞核皺縮，部分線粒體仍表現(xiàn)出空泡化，高爾基體及粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)構(gòu)異常;EA組麻醉后第1天時(shí)，電鏡下見海馬神經(jīng)元胞質(zhì)輕度水腫，少部分線粒體呈空泡化，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)構(gòu)雖略有異常，但并沒有擴(kuò)張及脫顆?，F(xiàn)象出現(xiàn)，麻醉后第7天時(shí)，可見海馬神