矮牽牛STMADS11和FLC亞家族基因克隆及功能分析.pdf_第1頁(yè)
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1、矮牽牛(Petunia hybrida)是茄科矮牽牛屬花卉,多年生常做一年生栽培,被廣泛用于城市園林綠化,同時(shí)又是分子生物學(xué)研究的模式植物之一。MADS-box基因廣泛存在于植物中,其編碼的轉(zhuǎn)錄因子在植物生長(zhǎng)發(fā)育的各個(gè)階段發(fā)揮重要作用。目前,矮牽牛中MADS-box基因家族的研究主要集中在ABCDE類基因,其它大部分亞家族基因功能尚不明確。STMADS11和FLC類基因是MADS-box家族的兩個(gè)亞家族,其中STMADS11亞家族主要與

2、營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)和開(kāi)花時(shí)間調(diào)控有關(guān),而FLC亞家族主要與春化作用有關(guān),但在除擬南芥等模式植物以外的大多數(shù)物種中其功能仍然不清晰。
  本課題主要研究矮牽牛STMADS11和FLC亞家族基因的功能,通過(guò)克隆STMADS11亞家族的FBP13、FBP25和FLC亞家族的PMADS6、PMADS15、PMADS17,分別構(gòu)建超表載體和RNAi載體,轉(zhuǎn)化矮牽牛,獲得轉(zhuǎn)基因植物并進(jìn)行表型觀測(cè),從而鑒定基因功能。主要研究結(jié)果如下:
  (1)從

3、矮牽牛全基因組數(shù)據(jù)庫(kù)中獲取基因序列信息,設(shè)計(jì)特異引物,以野生型矮牽牛W115 cDNA為模板,擴(kuò)增FBP13、FBP25、PMADS6、PMADS15、PMADS17基因,并構(gòu)建超表載體和干涉載體。
  (2)構(gòu)建FBP13、FBP25、PMADS6、PMADS15、PMADS17五個(gè)基因的超表載體和干涉載體,轉(zhuǎn)化矮牽牛W115,獲得轉(zhuǎn)化苗,其中各個(gè)載體的轉(zhuǎn)化苗數(shù)量如下:PMADS6、PMADS15、PMADS17、FBP13、F

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