持續(xù)表達(dá)HBsAg細(xì)胞靶向清除的載體構(gòu)建研究和初步應(yīng)用.pdf

1、目的:研究丙型肝炎病毒(Hepatitis c virus,HCV)核糖體插入位點(IRES)生物學(xué)功能,分析HCV核心蛋白與其的相互作用,構(gòu)建以HBV S基因為靶向基因的且具有自我調(diào)控能力的乙型肝炎病毒基因治療載體,為后續(xù)的建立乙型肝炎及其相關(guān)性疾病的非細(xì)胞溶解性清除HBV機(jī)制提供理想的基因治療載體.結(jié)論:間接免疫熒光證明HCV IRES位點可以啟動下游基因翻譯.以此為基礎(chǔ),構(gòu)建了具有自我調(diào)控功能的基因治療攜帶載體,測序結(jié)果表明構(gòu)建載

2、體序列的正確性;轉(zhuǎn)染2.2.15細(xì)胞和HepG<,2>細(xì)胞結(jié)果表明:不需要其它因子誘導(dǎo),構(gòu)建的pcDNA<,3>-SCITK系統(tǒng)能夠隨著感染細(xì)胞內(nèi)HBsAg的變化,自我調(diào)控下游TK基因表達(dá),產(chǎn)生針對2.2.15細(xì)胞特異性殺傷作用.pcDNA<,3>-SCITK在一定程度上具有模擬人體基因本身的調(diào)控功能和效應(yīng)基因(TK基因)靶向性.該載體系統(tǒng)構(gòu)建成功可以為后續(xù)的在乙型肝炎患者體內(nèi)靶向非細(xì)胞溶解清除HBV機(jī)制或TK基因效應(yīng)機(jī)制形成,建立體內(nèi)