CD71與Ki-67反映白血病細(xì)胞增殖狀況的關(guān)聯(lián)性分析.pdf

1、目的:
　　分析急性髓細(xì)胞白血病細(xì)胞系(HL-60)和慢性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞系(K562)以及白血病患者骨髓標(biāo)本中異常細(xì)胞CD71（轉(zhuǎn)鐵蛋白受體1）和Ki-67（腫瘤增殖性核抗原）的表達(dá)情況以及兩者在評(píng)價(jià)細(xì)胞增殖活性方面的關(guān)系，探討以CD71代替Ki-67作為白血病腫瘤細(xì)胞增殖活性指標(biāo)的可行性。
　　方法:
　　(1)細(xì)胞培養(yǎng)及骨髓標(biāo)本的收集:培養(yǎng)HL-60細(xì)胞和K562細(xì)胞，繪制生長(zhǎng)曲線，選取處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞;搜集

2、2013年5月～2014年1月鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院中未經(jīng)治療的白血病患者的骨髓標(biāo)本。
　　(2)CD71和Ki-67的表達(dá)情況及其陽性表達(dá)率的關(guān)聯(lián)性分析:用只破膜以及破膜和標(biāo)記相應(yīng)的同型對(duì)照抗體的同一種腫瘤細(xì)胞樣本調(diào)節(jié)流式細(xì)胞儀的電壓和補(bǔ)償，以進(jìn)行破膜和標(biāo)記Ki-67-FITC和CD71-PE的腫瘤細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)組，檢測(cè)這些腫瘤細(xì)胞胞膜表面CD71蛋白和胞核中Ki-67蛋白的表達(dá)情況，并對(duì)CD71和Ki-67蛋白陽性表達(dá)率的相關(guān)性進(jìn)

3、行分析。
　　(3)細(xì)胞增殖周期的分析:以腫瘤細(xì)胞系作為實(shí)驗(yàn)組，以淋巴細(xì)胞分離液提取的正常人外周血中的淋巴細(xì)胞作為對(duì)照組，依次經(jīng)過固定和碘化丙啶(PI)標(biāo)記后，用流式細(xì)胞儀檢測(cè)并用細(xì)胞周期分析軟件——ModFitLT分析腫瘤細(xì)胞中DNA含量的變化，計(jì)算出S期細(xì)胞比率(SPF)，確定腫瘤細(xì)胞的增殖活性，分析CD71的陽性表達(dá)率與SPF的關(guān)系。
　　結(jié)果:
　　(1)K562細(xì)胞和HL-60細(xì)胞的SPF均較對(duì)照組的SPF顯

4、著升高(p＜0.05)。K562細(xì)胞的SPF值較HL-60的SPF值低(p＜0.05)。
　　(2)K562細(xì)胞和HL-60細(xì)胞CD71的陽性表達(dá)率與SPF均呈正向線性相關(guān)(p＜0.05)。
　　(3)K562細(xì)胞和HL-60細(xì)胞CD71的陽性表達(dá)率明顯高于Ki-67的陽性表達(dá)率(p＜0.05)，其差值分別為32.35533±1.0022954和28.822857±2.264420;K562細(xì)胞和HL-60細(xì)胞中CD71的陽

5、性率與Ki-67陽性率均呈線性相關(guān)(p＜0.05)。
　　(4)7例急性髓細(xì)胞白血病(AML)患者骨髓標(biāo)本中均不同程度地表達(dá)CD71，陽性率為(18.8629±12.27112)％;6例急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)患者骨髓標(biāo)本中也均不同程度地表達(dá)CD71，陽性率為(24.072857±20.9185673)％。AML組異常細(xì)胞CD71與Ki-67的陽性表達(dá)率無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)，ALL組異常細(xì)胞CD71與Ki-67的陽性表

6、達(dá)率有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)
　　結(jié)論:
　　(1)隨著Ki-67表達(dá)強(qiáng)度的增高，K562細(xì)胞和HL-60細(xì)胞CD71的表達(dá)強(qiáng)度逐漸加強(qiáng);與細(xì)胞增殖活性的變化相一致，HL-60細(xì)胞CD71的表達(dá)強(qiáng)度強(qiáng)于K562細(xì)胞;白血病患者骨髓中異常細(xì)胞均不同程度地表達(dá)CD71。因此，CD71可以作為腫瘤細(xì)胞增殖活性的指標(biāo)。
　　(2)HL-60細(xì)胞和K562細(xì)胞中CD71的陽性表率與Ki-67的陽性表達(dá)率存在正向線性相關(guān)，且C