ATRA誘導的自噬對多發(fā)性骨髓瘤OPM2細胞的影響.pdf

1、研究目的:近年來，由于自噬在腫瘤發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移方面的特性，其逐漸成為腫瘤靶向治療的研究熱點。本研究觀察了全反式維甲酸(ATRA)誘導多發(fā)性骨髓瘤細胞株OPM2自噬，并進一步研究了自噬對OPM2細胞增殖的影響。
　　研究方法:1.培養(yǎng)多發(fā)性骨髓瘤細胞株OPM2細胞，采用MTT法檢測ATRA不同濃度組(0、2、4、6、8、10μmol/L)、不同時間組(24h、36h、48h)對OPM2細胞增殖的影響，以確定ATRA作用于OPM2的

2、最佳濃度和最佳時間;2.實驗分為對照組和實驗組，電鏡下觀察自噬小體的形成、Western blot分析自噬標記蛋白LC3-Ⅱ的表達以明確自噬的發(fā)生;3.MTT法檢測抑制自噬前后OPM2細胞增殖的變化。
　　研究結(jié)果:1.MTT結(jié)果顯示ATRA能有效的抑制多發(fā)性骨髓瘤細胞株OPM2的增殖，并隨著濃度和時間的增加，其抑制率也相應的增高，呈濃度和時間依賴性，不同藥物濃度組、不同作用時間對多發(fā)性骨髓瘤OPM2細胞增殖抑制率差異均具有統(tǒng)計學

3、意義(P＜0.05)。且24h、36h、48h的IC50分別為9.3umol/L、4.8umol/L、3.6umol/。在隨后的實驗中采用濃度為5umol/L的ATRA處理OPM2細胞36h;2.ATRA作用于OPM2細胞后，電鏡下觀察到自噬小體增多，Westernblot檢測到ATRA處理后LC3-Ⅱ蛋白表達增強，加入自噬抑制劑3-MA后LC3-Ⅱ表達減低。提示ATRA誘導OPM2細胞發(fā)生了自噬;3.MTT檢測抑制自噬后OPM2細胞的