清濕化瘀法對子宮腺肌病小鼠雌激素效應(yīng)相關(guān)因子P450arom、COX2、PGE2的時(shí)空變化影響.pdf

1、目的：在臨床應(yīng)用清濕化瘀法治療 AM取得明顯臨床療效和前期實(shí)驗(yàn)研究的基礎(chǔ)上，運(yùn)用同種異體垂體移植方法建立AM動物模型，采用免疫組化的技術(shù)檢測P450arom、COX-2、PGE2變化。通過觀察上述雌激素效應(yīng)相關(guān)因子在AM治療前后隨動情周期變化的表達(dá)差異，及其各組在位及異位內(nèi)膜上的表達(dá)差異，研究清濕化瘀法治療AM的作用靶點(diǎn)，以期探索清濕化瘀法治療AM的作用機(jī)制。
　　方法：選取8周齡ICR小鼠86只，采用異體垂體移植的手術(shù)方法造模，

2、術(shù)后死亡2只。按隨機(jī)數(shù)字表法將84只造模小鼠分成7組，分別為3月模型組、6月模型組、內(nèi)異康復(fù)片高劑量組、中劑量組、低劑量組、中藥對照組（丹莪婦康煎膏）、西藥對照組（孕三烯酮）。另對12只小鼠做假手術(shù)，設(shè)為假手術(shù)組；12只做空白組。常規(guī)飼養(yǎng)3個月，將空白組、假手術(shù)組、3月模型組小鼠分別在動情期與間情期處死。其他組分別灌胃給予相應(yīng)濃度的藥物或蒸餾水（6月模型組）飼養(yǎng)3月后分別在動情期與間情期處死。病理切片、HE染色分組分析內(nèi)膜腺體及間質(zhì)侵潤

3、肌層的程度。觀察并評分研究清濕化瘀法治療子宮腺肌病的病理改變。
　　采用免疫組化方法，觀察治療前后在動情期和間情期各組在位及異位內(nèi)膜上雌激素效應(yīng)相關(guān)因子的表達(dá)（P450arom、 COX2、PGE2），尋找清濕化瘀法治療AM的可能靶點(diǎn)。
　　結(jié)果：
　　1.形態(tài)學(xué)上觀察到異位組織肌層浸潤并做子宮腺肌病嚴(yán)重程度分級評分，正常組和假手術(shù)組為0分，3月模型組動情期2.67分，間情期2.17分，6月模型組動情期3.50分，間情

4、期2.83分，分級指標(biāo)提示3月模型組子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞與腺體浸潤肌肉內(nèi)層，6月模型組子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞和腺體浸潤內(nèi)外肌層交界處，表明兩組均造模成功，且疾病嚴(yán)重程度隨病程而升高，手術(shù)過程對造模無影響。
　　2. P450、PGE2、COX-2的表達(dá)在形成AM模型后隨病程進(jìn)展逐漸升高，6月模型組高于3月模型組（P<0.05），6月模型組和3月模型組顯著高于正常組及假手術(shù)組（P<0.01），正常組與假手術(shù)組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

5、三個指標(biāo)在不同治療方法治療后均下降，內(nèi)異康復(fù)片高劑量組優(yōu)于其他各治療組，與6月模型組比較具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01），丹莪婦康煎膏、孕三烯酮與6月模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），各組間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。動情期指標(biāo)表達(dá)高于間情期，總體比較有統(tǒng)計(jì)意義（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.從組織形態(tài)學(xué)上觀察，疾病嚴(yán)重程度評分（浸潤程度）隨病程而升高，手術(shù)過程對造模無影響。雄鼠垂體雌鼠宮腔移植法造模

6、3月成功率達(dá)83％（10/12），造模6月成功率達(dá)到100%（12/12），是一個值得推廣的AM造模方法。
　　2.從實(shí)驗(yàn)指標(biāo)表達(dá)結(jié)果看，清濕化瘀法能夠通過下調(diào)在位及異位內(nèi)膜雌激素效應(yīng)相關(guān)因子P450、COX-2、 PGE2表達(dá)，阻斷雌激素生成的正反饋環(huán)，抑制雌激素的產(chǎn)生，從而治療AM。故我們可以認(rèn)為雌激素效應(yīng)相關(guān)因子P450、COX-2、 PGE2為清濕化瘀法的治療靶點(diǎn)。
　　3.內(nèi)異康復(fù)片高劑量對在位及異位內(nèi)膜雌激素效應(yīng)