轉(zhuǎn)染HER-2-neu基因?qū)ψ訉m內(nèi)膜癌細(xì)胞COX-2-PGE-,2--P450arom信號通路的影響.pdf

1、目的：
　　 利用基因轉(zhuǎn)染技術(shù),建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,HER-2/neu基因高表達(dá)的Ishikawa細(xì)胞株,檢測轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞株HER-2/neu、COX-2、P450arom蛋白的表達(dá)變化以及轉(zhuǎn)染前后E2表達(dá)的變化,探討HER-2/neu介導(dǎo)的COX-2/PGE2/P450arom信號通路在子宮內(nèi)膜癌雌激素依賴中的作用機(jī)制。
　　 方法
　　 1、應(yīng)用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)對子宮內(nèi)膜腺癌Ishikawa細(xì)胞株進(jìn)行培養(yǎng)；
　　

2、 2、利用基因轉(zhuǎn)染技術(shù)建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,HER-2/neu基因高表達(dá)的子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞株；
　　 3、Western-bloting方法檢測轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞COX-2、P450arom蛋白的表達(dá)水平；
　　 4、ELISA方法檢測轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞培養(yǎng)上清液中E2的含量；
　　 5、用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件對結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,并結(jié)合實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析HER-2/neu對COX-2/PGE2/P450arom信號通路的調(diào)控作

3、用,以探討HER-2/neu在雌激素依賴性子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展中的作用。
　　 結(jié)果
　　 1、建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染HER-2/neu基因的人子宮內(nèi)膜腺癌Ishikawa細(xì)胞,轉(zhuǎn)染后HER-2/neu基因的表達(dá)增加(P<0.05)；
　　 2、HER-2/neu基因表達(dá)增加(P<0.05)的同時COX-2、P450arom蛋白表達(dá)亦增加(P<0.05)；
　　 3、HER-2/neu、COX-2、P450arom表