跳躍運(yùn)動(dòng)下COX-2、PGE2及相關(guān)因子在大鼠跟腱末端區(qū)的表達(dá)研究.pdf

1、目的:跟腱末端區(qū)作為人體受力的重要部位,多重應(yīng)力刺激使跟骨長(zhǎng)期處在復(fù)雜的力學(xué)環(huán)境下,細(xì)胞架構(gòu)不斷產(chǎn)生變化,而長(zhǎng)時(shí)間受力過(guò)度或不合理都可能使細(xì)胞架構(gòu)改變異常而壞死。COX-2、PGE2因子及其信號(hào)通路對(duì)應(yīng)力刺激敏感,其產(chǎn)生的一系列生物化學(xué)反應(yīng)對(duì)腱骨連接各結(jié)構(gòu)的發(fā)展變化中有一定的作用。RANKL作為促進(jìn)破骨細(xì)胞分化的重要因子,其表達(dá)直接影響破骨細(xì)胞活性,與COX-2、PGE2可作為探討跟骨中骨吸收等情況的研究指標(biāo)。因此,本文研究跳躍運(yùn)動(dòng)下C

2、OX-2、PGE2的在腱骨連接中的變化規(guī)律,以及與RANKL在跟骨中的變化關(guān)系,從基因水平來(lái)研究末端病發(fā)病機(jī)制,為末端病治療提供一定的治療依據(jù)。
　　方法:本實(shí)驗(yàn)將72只200g左右的8周齡雄性SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組(24只)、跳躍組(24只)和負(fù)重跳躍組(24只)以及2周組、4周組、6周組。采用自制半自動(dòng)調(diào)時(shí)調(diào)壓大鼠跳躍籠對(duì)大鼠進(jìn)行為期7周的跳躍運(yùn)動(dòng),每運(yùn)動(dòng)兩周之后處死大鼠取血及兩條后腿跟骨末端區(qū)部位,該部位從脛骨中段包括后側(cè)腓

3、腸肌直至足部中段。HE染色切片觀察整個(gè)腱骨連接部位的內(nèi)部變化,采用免疫組化(immunohistochemistry)方法測(cè)定 COX-2、PGE2在腱骨連接各部位的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量,以及采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time PCR)測(cè)定跟骨組織COX-2、PGE2、RANKL的mRNA水平。分析應(yīng)力刺激下的COX-2 mRNA、PGE2 mRNA、RANKL mRNA變化規(guī)律。
　　結(jié)果:
　　1、HE染色切片中,隨著跳

4、躍運(yùn)動(dòng)負(fù)荷的增加及跳躍時(shí)間的延長(zhǎng),跳躍組與負(fù)重跳躍組出現(xiàn)了典型的末端病癥狀。
　　2、對(duì)照組2周、4周、6周的大鼠腱骨連接各部位中COX-2、PGE2陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)變化差異,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);跟骨內(nèi) COX-2 mRNA、PGE2 mRNA、RANKL mRNA表達(dá)量逐漸增加,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05);跳躍組2周、4周與6周之間大鼠腱骨連接各部位中 COX-2、PGE2陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量有顯著性差異(P<0.01),具有統(tǒng)計(jì)

5、學(xué)意義;跟骨內(nèi)COX-2 mRNA、PGE2 mRNA、RANKL mRNA表達(dá)量逐漸增加,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。跳躍負(fù)重組2周、4周與6周間大鼠腱骨連接各部位中COX-2、PGE2陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)有差異,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05);跟骨內(nèi)COX-2 mRNA、PGE2 mRNA、RANKL mRNA表達(dá)量逐漸增加,有顯著性差異,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.01)。
　　3、2周對(duì)照組、跳躍組、跳躍負(fù)重組大鼠腱骨連接各部位中 C

6、OX-2、PGE2陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量逐漸增加,有顯著性差異,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);大鼠跟骨內(nèi)COX-2 mRNA、PGE2 mRNA、RANKL mRNA表達(dá)量逐漸增加,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。4周對(duì)照組、跳躍組、跳躍負(fù)重組大鼠腱骨連接各部位中COX-2、PGE2陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量逐漸增加,有顯著性差異,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);大鼠跟骨內(nèi)COX-2 mRNA、PGE2 mRNA、RANKL mRNA表達(dá)量持續(xù)增加,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意

7、義(p<0.01)。6周對(duì)照組、跳躍組、跳躍負(fù)重組大鼠腱骨連接各部位中COX-2、PGE2陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量逐漸增加,有顯著性差異,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);大鼠跟骨內(nèi)COX-2 mRNA、PGE2 mRNA、RANKL mRNA表達(dá)量持續(xù)增加,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。
　　結(jié)論：
　　1、隨著運(yùn)動(dòng)時(shí)間的延長(zhǎng)及運(yùn)動(dòng)負(fù)荷的積累,末端部位結(jié)構(gòu)產(chǎn)生變化,發(fā)生病理性改變,其原因主要是應(yīng)力刺激使末端部位產(chǎn)生炎癥反應(yīng),而導(dǎo)致末端病