清濕化瘀法調(diào)控子宮腺肌病小鼠雌激素效應(yīng)相關(guān)受體.pdf

1、目的采用具有清濕化瘀功效的協(xié)定方劑（內(nèi)異康復(fù)片）作用于子宮腺肌病模型小鼠，以雌激素效應(yīng)相關(guān)受體ERα、ERβ、GPER、PR-A、PR-B為研究靶點(diǎn)，觀察小鼠在用藥前后及疾病發(fā)展的不同時(shí)期，子宮局部上述雌激素效應(yīng)相關(guān)受體隨動(dòng)情周期變化的表達(dá)差異，以期探索清濕化瘀法治療子宮腺肌病的作用機(jī)制。
　　方法運(yùn)用同種異體垂體移植方法建立子宮腺肌病動(dòng)物模型。隨后將造模小鼠隨機(jī)分為3月模型組、6月模型組、內(nèi)異康復(fù)片（NYK）高劑量組、中劑量組、

2、低劑量組、丹莪婦康煎膏組（DE，中藥對(duì)照組）、孕三烯酮組（GN，西藥對(duì)照組）。另設(shè)假手術(shù)組及空白對(duì)照組。每組均為12只小鼠。常規(guī)飼養(yǎng)3月后，將3月模型組、假手術(shù)組、空白組小鼠分別在動(dòng)情期與間情期處死。其余各用藥組小鼠及6月模型組在連續(xù)灌胃相應(yīng)不同濃度的藥物或繼續(xù)常規(guī)飼養(yǎng)3月后分別在動(dòng)情期與間情期處死。采用real-time PCR及western blot技術(shù)檢測(cè)小鼠子宮ERα、ERβ、GPER、PR-A、PR-B mRNA及蛋白的表達(dá)

3、情況。
　　結(jié)果
　　1.正常組與假手術(shù)組比較：各受體mRNA及蛋白的表達(dá)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　2.3月模型組、6月模型組分別與正常組比較：各受體mRNA及蛋白的表達(dá)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　3.3月模型組與6月模型組比較：各受體mRNA及蛋白的表達(dá)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　4.各治療組與6月模型組小鼠比較：
　?。?）ERα NYK高中劑量組、DE

4、組、GN組mRNA及蛋白的表達(dá)，在動(dòng)情期及間情期均有顯著下降（P<0.05）；NYK低劑量組僅在間情期下降顯著（P<0.05）。
　?。?）ERβ在mRNA水平，動(dòng)情期及間情期的NYK高劑量組、DE組、GN組均顯著下降（P<0.05）；而NYK中劑量組僅在間情期顯著下降（P<0.05）。在蛋白水平，各治療組均顯著下降（P<0.05）。
　　（3）GPER NYK高劑量組、DE組、GN組mRNA及蛋白的表達(dá)，在動(dòng)情期及間情期均

5、下降顯著（P<0.05）；其余治療組則無(wú)顯著差異（P>0.05）。
　　（4）PR-A在mRNA水平，動(dòng)情期及間情期的NYK高中劑量、DE組、GN組均顯著上調(diào)（P<0.05）；NYK低劑量組僅在動(dòng)情期表現(xiàn)為顯著上調(diào)（P<0.05）。在蛋白水平，動(dòng)情期及間情期的NYK高劑量組、DE組、GN組均顯著上調(diào)（P<0.05）；而NYK中劑量組僅在間情期表現(xiàn)為顯著上調(diào)（P<0.05）。
　?。?）PR-B在動(dòng)情期，僅NYK高劑量組及DE

6、組的mRNA及蛋白表現(xiàn)顯著上調(diào)（P<0.05）；在間情期，僅在NYK高劑量組及DE組的mRNA水平有顯著上調(diào)（P<0.05）。
　　5.動(dòng)情期與間情期比較：在正常組及假手術(shù)組，各受體mRNA及蛋白的表達(dá)在兩期的表達(dá)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；在兩模型組，僅在PR-A mRNA水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；在各治療組，僅NYK高劑量組、DE組、GN組的PR-B蛋白水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　結(jié)

7、論
　　1.AM的發(fā)生與子宮局部雌孕激素受體表達(dá)數(shù)量的變化有關(guān)，本研究結(jié)果顯示為ERα、ERβ、GPER的上調(diào)及PR-A、PR-B受體的下調(diào)。在雌激素受體的異常表達(dá)中，新型受體GPER與核受體ERα、ERβ的表達(dá)具有一定的同步性，三者發(fā)揮著協(xié)同作用，但以核受體占優(yōu)勢(shì)，尤其以ERα為主。另外雌孕激素受體亞型的分布模式的改變及受體周期性表達(dá)的喪失也可能是AM發(fā)病的生物學(xué)基礎(chǔ)。
　　2.清濕化瘀類(lèi)方藥可通過(guò)降調(diào)子宮局部雌激素受體E

8、Rα、ERβ、GPER的表達(dá)，以降低雌激素對(duì)子宮內(nèi)膜腺體及間質(zhì)細(xì)胞的增生作用；同時(shí)上調(diào)PR-A、PR-B的表達(dá)，以增強(qiáng)孕激素拮抗雌激素的效能；如此雙向靶控調(diào)節(jié)雌激素效應(yīng)相關(guān)受體的表達(dá)，從而改善異常的雌激素效應(yīng)。
　　3.高劑量?jī)?nèi)異康復(fù)片在調(diào)控ERα、ERβ、GPER、PR-A的表達(dá)方面與其他治療方法相同；在調(diào)控PR-B的表達(dá)方面優(yōu)于西藥對(duì)照組。故清濕化瘀類(lèi)方藥的運(yùn)用為中醫(yī)藥治療AM提供了一種新的思路方法，值得深入研究與推廣。