人脂肪干細(xì)胞與乳腺癌MCF-7、BT474細(xì)胞旁分泌機(jī)制影響的體外實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:世界范圍內(nèi)，女性乳腺癌發(fā)病率逐年增高。根據(jù)國際癌癥研究中心報(bào)告，2008年調(diào)查結(jié)果顯示新發(fā)乳腺癌在女性腫瘤發(fā)病的22.9％，死亡占女性腫瘤的13.7％[1]。在中國，乳腺癌的發(fā)病趨勢(shì)傾向年輕女性，新發(fā)生率和死亡率明顯增高。隨著乳腺癌診療水平的提高，早期診斷陽性率更加準(zhǔn)確，乳腺癌的治療方案也有所改變，保乳手術(shù)現(xiàn)今已成為歐美國家治療和研究乳腺癌的熱點(diǎn)[2]。但仍有部分患者需要全乳切除術(shù)等治療，術(shù)后乳腺缺如或者畸形造成患者嚴(yán)重的心理障礙

2、，顯著降低生活質(zhì)量[3]。乳腺癌術(shù)后對(duì)乳房整形的需求越來越多，從早期即時(shí)皮瓣乳房再造到假體置入，都有各自的缺點(diǎn)而讓患者不能接受。材料填充技術(shù)近年在整形外科發(fā)展迅速，自體脂肪曾一度作為理想的填充材料，讓整形外科醫(yī)師看到希望，由于移植后脂肪其成活率低，遠(yuǎn)期效果差而幾近淘汰。1995年Coleman成功完成自體顆粒脂肪移植豐乳術(shù)，讓整形自體組織填充看到希望[4]。2006年自體顆粒脂肪細(xì)胞輔助移植技術(shù)(Cell assisted lipotr

3、ansfer,CAL)的應(yīng)用，在整形外科領(lǐng)域，豐乳、面部凹陷整形和豐臀等方面的遠(yuǎn)期效果理想。移植脂肪組織的萎縮、囊腫、鈣化和壞死率都有明顯減少。CAL通過增加人脂肪來源干細(xì)胞(Human adipocyte-derived stem cells，hADSCs)含量，促進(jìn)脂肪顆粒移植存活和脂肪細(xì)胞增殖生長(zhǎng)，其成活率增長(zhǎng)為30～70％[5]。hADSCs成脂分化中的調(diào)節(jié)機(jī)制研究是脂肪顆粒移植的重點(diǎn)，是組織塑形的關(guān)鍵。只有hADSCs向成熟正

4、常細(xì)胞分化，才能保證移植的生物安全性。
　　 CAL在先天性乳房發(fā)育不全、外傷性乳腺畸形等方面取得良好的效果，可多次行CAL改善乳房外形，達(dá)到塑形效果。但對(duì)于女性乳腺癌患者治療術(shù)后乳房整形，國內(nèi)外還有爭(zhēng)議?，F(xiàn)今女性乳腺癌發(fā)病率有所上升，由于醫(yī)療條件的改善，早期發(fā)現(xiàn)乳腺癌的幾率增加，乳腺外科逐漸乳腺癌保乳術(shù)作為乳腺癌手術(shù)治療的首選術(shù)式[6，7]。患者術(shù)后治療方案?jìng)€(gè)體化，使生存率得到延長(zhǎng)，生活質(zhì)量有所提高。但術(shù)后女性患者由于乳房縮小

5、、不對(duì)稱等因素影響到生活心理，對(duì)微創(chuàng)乳腺整形提出要求。傳統(tǒng)二期假體置入隆乳術(shù)缺點(diǎn)為原有手術(shù)瘢痕明顯增寬，術(shù)區(qū)因瘢痕粘連置放假體困難，術(shù)后局部反應(yīng)重，乳房因瘢痕牽拉外形不滿意等。此外乳房假體有可能破裂造成患者心理負(fù)擔(dān)過重，影響生活，迫切需要微創(chuàng)有效的乳房整形。乳腺顆粒脂肪細(xì)胞輔助移植術(shù)，能解決以上不良情況，對(duì)局部隆乳可按需填充，具有最大限度的調(diào)節(jié)乳房外形、創(chuàng)傷小，減輕患者二次手術(shù)痛苦等優(yōu)點(diǎn)。但對(duì)其安全性有很大爭(zhēng)議。美國整形外科協(xié)會(huì)和法國整

6、形外科協(xié)會(huì)對(duì)細(xì)胞輔助顆粒脂肪移植的生物安全性提出質(zhì)疑，通過臨床病例對(duì)照研究，仍未發(fā)現(xiàn)確切的證據(jù)說明其對(duì)乳腺癌復(fù)發(fā)、局部浸潤(rùn)以及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有影響[8-10]。現(xiàn)今還需大量臨床病例研究進(jìn)行遠(yuǎn)期隨訪。體外實(shí)驗(yàn)及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)也沒有明確說明細(xì)胞輔助的脂肪顆粒移植對(duì)乳腺癌術(shù)后局部復(fù)發(fā)、進(jìn)展和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，仍具有很多爭(zhēng)議[11]。
　　 乳腺癌細(xì)胞對(duì)hADSCs的影響是多方面的。其主要通過細(xì)胞之間旁分泌相應(yīng)的細(xì)胞因子，互相刺激彼此生長(zhǎng)、增殖、遷移。同時(shí)

7、對(duì)hADSCs多向分化功能產(chǎn)生一定的影響。在CAL中，移植物主要植入皮下、乳腺脂肪及胸大肌等處。hADSCs根據(jù)植入物所處的微環(huán)境，主要促進(jìn)脂肪組織生長(zhǎng)和hADSCs成脂分化為主。在乳腺癌術(shù)后切除局部區(qū)域進(jìn)行CAL，對(duì)hADSCs成脂分化產(chǎn)生的影響還不得而知。
　　 CAL因其增加hADSCs含量，對(duì)乳腺癌細(xì)胞的影響也是二期行CAL乳房整形手術(shù)應(yīng)關(guān)注的焦點(diǎn)之一[11]。移植的hADSCs是否在乳腺癌術(shù)后的微環(huán)境能成活和正常分化及

8、其轉(zhuǎn)歸？對(duì)乳腺癌細(xì)胞侵襲力產(chǎn)生作用？主要作用機(jī)理是什么？[12]因?yàn)榭紤]細(xì)胞之間的主要作用通過旁分泌機(jī)制調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長(zhǎng)、發(fā)育、分化和代謝，所以我們選用乳腺癌無轉(zhuǎn)移的細(xì)胞株腺癌MCF-7和浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌BT474作為研究對(duì)象，通過體外培養(yǎng)hADSCs、MCF-7、BT474細(xì)胞，生長(zhǎng)旺盛時(shí)期，收集細(xì)胞無血清培養(yǎng)液，以及成脂條件培養(yǎng)液，分析細(xì)胞間的相互作用。從而為CAL的生物安全性提供理論依據(jù)。
　　 hADSCs成脂過程中，細(xì)胞轉(zhuǎn)錄

9、因子影響起主導(dǎo)作用?，F(xiàn)今研究得出。轉(zhuǎn)錄因子過氧化物酶體增殖物激活受體γ(Peroxisome proliferator-activated receptor-γ，PPARγ)、固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白(sterol regulated element binding protein，SREBP1)、脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白（Fatty acid binding proteins，aP2）和(CCAAT/enhancer binding prot

10、eins，C/EBP)等均促進(jìn)hADSCs脂肪分化，各轉(zhuǎn)錄因子之間互相調(diào)節(jié)，促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)脂肪形成，尤其以PPARγ和SREBP1作用明顯[13]。各轉(zhuǎn)錄因子在不同細(xì)胞還存在其他功能，其中aP2在腫瘤細(xì)胞增殖有雙向調(diào)節(jié)作用，影響腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)[14]。而PPARγ、SREBP1能促進(jìn)細(xì)胞成熟，抑制細(xì)胞異常增生[15]。各種因子間存在互相調(diào)節(jié)，依據(jù)其細(xì)胞特性和微環(huán)境而變化，因hADSCs在成脂過程中旁分泌作用，是否對(duì)乳腺癌細(xì)胞的侵襲力有

11、影響？主要途徑是什么？都有待研究。
　　 乳腺癌細(xì)胞和hADSCs、成脂細(xì)胞(Adipocyte，AC)生長(zhǎng)過程中，分泌大量的細(xì)胞因子和蛋白酶類，其影響細(xì)胞的生長(zhǎng)，增殖，分化、復(fù)發(fā)和侵襲。其中與乳腺癌細(xì)胞的遷移、浸潤(rùn)作用明確有關(guān)的細(xì)胞因子有尿激酶型纖維蛋白酶原激活劑(Urokinase type plasminogen activator，uPA)、基質(zhì)金屬蛋白酶2(matrixmetalloproteinase-2，MMP2)

12、、基質(zhì)金屬蛋白酶9（基質(zhì)金屬蛋白酶9，MMP9）和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(Vascular endothelial growth factor，VEGF)[16,17]。金屬蛋白酶家族主要溶解間質(zhì)膠原，為腫瘤細(xì)胞侵潤(rùn)提供一定的空間基礎(chǔ)，從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖和侵襲力。這些因子在正常細(xì)胞中也通過旁分泌作用產(chǎn)生新生血管，組織體積擴(kuò)充以及促進(jìn)組織生長(zhǎng)等。同樣也是腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、浸潤(rùn)的基礎(chǔ)。通過對(duì)細(xì)胞相關(guān)因子的研究，可以分析細(xì)胞間旁分泌作用機(jī)制，為乳腺癌

13、術(shù)后的脂肪顆粒移植隆乳成活機(jī)理，乳腺癌復(fù)發(fā)、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移提供分子生物學(xué)理論依據(jù)。
　　 方法:
　　 1取人皮下脂肪組織，Ⅰ型膠原酶消化原代分離培養(yǎng)脂肪干細(xì)胞(hADSCs)，通過成脂、成骨多向誘導(dǎo)分化和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CD29、CD34、CD44、CD45、CD105鑒定hADSCs。原代hADSCs培養(yǎng)到第三、四代，更換成脂培養(yǎng)液培養(yǎng)，動(dòng)態(tài)觀察成脂情況，于第6d、12d細(xì)胞提取mRNA和總蛋白，熒光定量PCR檢測(cè)PPAR

14、γmRNA、SREBF1 mRNA變化，Westernblot檢測(cè)PPARγ、SREBF1含量變化，分析hADSCs成脂過程中轉(zhuǎn)錄因子的變化。
　　 2 hADSCs和AC細(xì)胞在96孔板內(nèi)培養(yǎng)，待細(xì)胞融合為孔底面積80％以上時(shí)，按1∶2、1∶8、1∶16比例將MCF-7和BT474條件培養(yǎng)液和DMEM、成脂培養(yǎng)基（FBS終濃度為10％）混合進(jìn)行培養(yǎng)，于24h、48h、72hMTT酶標(biāo)儀檢測(cè)，確定混合培養(yǎng)液最適濃度比例。
　

15、　 3待細(xì)胞生長(zhǎng)至瓶底80％以上時(shí)，使用成脂培養(yǎng)基、MCF-7和BT474條件培養(yǎng)基加上成脂培養(yǎng)基（終末FBS為10％）共同培養(yǎng)hADSCs和AC，待大量脂肪細(xì)胞形成后，提取提取mRNA和總蛋白，熒光定量PCR檢測(cè)對(duì)轉(zhuǎn)錄因子SREBF-1、PPARγ; Western blot檢測(cè)MCF-7、BT474條件培養(yǎng)基對(duì)hACSCs和AC的SREBP-1、PPARγ的影響。
　　 4 hADSCs、AC細(xì)胞生長(zhǎng)至培養(yǎng)瓶底80％以上時(shí)

16、，換用無血清培養(yǎng)基，培養(yǎng)24h后收集，運(yùn)用Transwell小室實(shí)驗(yàn)技術(shù)，預(yù)制基質(zhì)膠，上室為MCF-7、BT474細(xì)胞+10％FBS，下室為hADSCs細(xì)胞培養(yǎng)液、AC細(xì)胞培養(yǎng)液(終濃度含10％FBS)，培養(yǎng)24h后，擦去上室基底基質(zhì)膠，10％多聚甲醛細(xì)胞固定后結(jié)晶紫染色，倒置顯微鏡下觀察，采集圖像，結(jié)晶紫脫色后，酶標(biāo)儀測(cè)定，間接反映浸潤(rùn)細(xì)胞含量。
　　 5 MCF-7、BT474、hADSCs、AC細(xì)胞生長(zhǎng)至培養(yǎng)瓶底80％以上

17、時(shí)，換用無酚紅的無血清培養(yǎng)基，24h后收集培養(yǎng)液，ELISA方法檢測(cè)培養(yǎng)液中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、金屬蛋白酶2(MMP2)、金屬蛋白酶9(MMP9)、尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)含量。
　　 6培養(yǎng)MCF-7、BT474、hADSCs、AC-12細(xì)胞生長(zhǎng)至瓶底80％以上時(shí)，提取mRNA和總蛋白，熒光定量PCR檢測(cè)對(duì)轉(zhuǎn)錄因子aP2、PPARγmRNA; Westernblot檢測(cè)aP2、PPARγ。
　　 結(jié)果

18、:
　　 1 hADSCs第三、四代為長(zhǎng)纖維狀細(xì)胞，成簇條索狀排列，細(xì)胞中無脂滴。成骨誘導(dǎo)12d可見成骨細(xì)胞形成，但鈣鹽沉積較少，細(xì)胞明顯變大變圓。油紅”O(jiān)”染色、茜素紅染色陽性，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)第三代人脂肪干細(xì)胞CD29、CD44、CD105為陽性，CD34、CD45表達(dá)為陰性。成脂誘導(dǎo)6d開始有脂滴形成，12d脂滴明顯增多，部分融合大脂滴，細(xì)胞形態(tài)為多邊形。成脂誘導(dǎo)6d、12d細(xì)胞PPARγmRNA、SREBF1 mRNA均有

19、表達(dá)。SREBF1 mRNA6d、12d表達(dá)與相應(yīng)蛋白不一致，主要靠轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)為主。PPARγ在轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)節(jié)。
　　 21∶8的MCF-7、BT474條件培養(yǎng)基促進(jìn)hADSCs和AC的增殖;MCF-7、BT474條件培養(yǎng)基對(duì)hADSCs分化為脂肪細(xì)胞的時(shí)間無影響。MCF-7、BT474條件培養(yǎng)基對(duì)細(xì)胞中hADSCs成脂前后PPARγ表達(dá)無規(guī)律，可能存在旁分泌抑制調(diào)節(jié)，MCF-7對(duì)PPARγ抑制更明顯。SREBF-1仍以轉(zhuǎn)錄后調(diào)

20、節(jié)為主。成脂后期均有明顯增高，MCF-7中表達(dá)明顯增高。與正常成脂分化和BT474條件培養(yǎng)液相比，具有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。
　　 3 Transwell小室實(shí)驗(yàn)得出hADSCs在成脂前后可增強(qiáng)MCF-7、BT474的侵襲性，hADSCs作用明顯(P＜0.05)。MCF-7結(jié)晶紫染色hADSCs條件培養(yǎng)液組OD為0.263±0.009; AC條件培養(yǎng)液組OD為0.202±0.004，作用較弱(P＜0.05);BT474

21、hADSCs條件培養(yǎng)液組結(jié)晶紫染色OD為0.263±0.005; AC條件培養(yǎng)液組OD為0.206±0.009，作用弱(P＜0.05);
　　 4 uPA、VEGF、MMP2、MMP9在hADSCs成脂分化后培養(yǎng)基中均有表達(dá)（分別為4.80×103±266.67 pg/ml、5.10×103±91.30 pg/ml、187.45±20.61 pg/ml、278.97±56.89 pg/ml、4.77×104±0.03 pg/ml

22、、4.93×104±0.22 pg/ml、1.93×103±190.0pg/ml、0.618×103±156.0 pg/ml）;MCF-7、BT474條件培養(yǎng)基中無MMP2表達(dá)，MMP9含量無差別（為1.37×103±186.67 pg/ml、0.384×103±136.0 pg/ml），其MCF-7中uPA和VEGF含量呈平行趨勢(shì)，含量明顯高于hADSCs和成脂細(xì)胞培養(yǎng)液（1.7×104±566.67 pg/ml、320.945±28

23、.03 pg/ml），BT474中VEGF含量較高(371.955±37.512 pg/ml),uPA(5.10×103±88.73 pg/ml)，與hADSCs和AC培養(yǎng)液中明顯差異。在乳腺癌中血管成形能力強(qiáng)，侵襲力較弱;MMP2在hADSCs成脂前后表達(dá)均高（4.77×104±30pg/ml、4.93×104±220pg/ml）。
　　 5熒光定量PCR、Westernblot檢測(cè)MCF-7、BT474中低表達(dá)PPARγmR

24、NA及無蛋白表達(dá);在hADSCs、AC-12中PPARγ高表達(dá)，分別為0.591±0.005、0.903±0.009，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;aP2蛋白在MCF-7、hADSCs、BT474、AC-12均有表達(dá)。其中AC-12高表達(dá)，為1.203±0.004，BT474中為0.520±0.002，呈低表達(dá)。
　　 結(jié)論:
　　 CAL技術(shù)的臨床應(yīng)用已經(jīng)趨于成熟，但適用范圍較狹，美國整形外科協(xié)會(huì)提出對(duì)乳腺癌術(shù)后的脂肪移植治療需有專家

25、評(píng)估，根據(jù)具體評(píng)定是否適合脂肪移植治療[18]。本課題就乳腺癌保乳術(shù)后CAL中乳腺癌切除術(shù)后“癌床”微環(huán)境對(duì)hADSCs成脂前后的影響，以及hADSCs對(duì)乳腺癌細(xì)胞侵襲力影響進(jìn)行探討，為CAL是否適用于乳腺癌保乳術(shù)后的乳房整形提供基礎(chǔ)細(xì)胞學(xué)理論依據(jù)。
　　 1 CAL中增加hADSCs的量，在移植組織起輔助作用。在體外模擬成脂微環(huán)境發(fā)現(xiàn)，hADSCs成脂誘導(dǎo)6d，細(xì)胞內(nèi)開始出現(xiàn)細(xì)小脂滴，12d分化為脂肪細(xì)胞。細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)部分脂滴融

26、合，形態(tài)由細(xì)長(zhǎng)型變?yōu)槎嘟切?。轉(zhuǎn)錄因子PPARγmRNA及其蛋白隨時(shí)間逐步升高，后期達(dá)高峰，在轉(zhuǎn)錄水平進(jìn)行調(diào)節(jié)。PPARγmRNA及其蛋白參與中后期促進(jìn)hADSCs成脂和脂肪細(xì)胞成熟。SREBP1mRNA與SRBPF1隨時(shí)間表達(dá)不一致，SRBPF1mRNA隨時(shí)間逐漸增高，說明SREBP1屬于轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)。兩者在體外整個(gè)hADSCs成脂分化中參與調(diào)節(jié)，促進(jìn)脂肪細(xì)胞形成及其表型表達(dá)。
　　 2乳腺癌細(xì)胞旁分泌對(duì)hADSCs成脂時(shí)間無明顯

27、影響。其旁分泌因子影響hADSCs成脂過程中細(xì)胞內(nèi)成脂轉(zhuǎn)錄因子PPARγmRNA、SREBF1mRNA及其表達(dá)產(chǎn)物。PPARγ無規(guī)律可循，SREBP1仍為轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)。充分說明細(xì)胞成脂分化仍受到微環(huán)境影響，部分呈抑制。可能存在其他通路對(duì)PPARγ抑制。但乳腺癌細(xì)胞脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)功能仍受SREBP1影響，在成脂環(huán)境中，脂肪細(xì)胞為乳腺癌細(xì)胞提供“能源”。
　　 3雖然轉(zhuǎn)錄因子相同，但在不同細(xì)胞中作用不同。hADSCs、MCF-7、BT474

28、和AC中，轉(zhuǎn)錄因子PPARγmRNA在MCF-7和BT474表達(dá)較低，PPARγ在乳腺癌細(xì)胞中無表達(dá)，提示PPARγ在乳腺癌中影響細(xì)胞周期，間接反映細(xì)胞的惡性程度。轉(zhuǎn)錄因子aP2在hADSCs成脂誘導(dǎo)中主要影響PPRAγ的表達(dá)，具有促成脂作用;在乳腺癌腫瘤細(xì)胞中，與原癌基因結(jié)合，隨癌細(xì)胞惡性程度而呈現(xiàn)高表達(dá)。
　　 4 hADSCs成脂前后增強(qiáng)乳腺癌細(xì)胞侵襲性，與乳腺癌細(xì)胞、hADSCs、AC旁分泌VEGF、MMP2、MMP9、

29、uPA等細(xì)胞因子和蛋白酶有關(guān)[19-22]。hADSCs旁分泌影響較大。hADSCs分泌MMP2、MMP9為血管和細(xì)胞生長(zhǎng)提供空間，溶解基質(zhì)后，可加速血管之間的連接，形成有效的循環(huán)，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。另一方面，對(duì)癌細(xì)胞來講，也提供血運(yùn)轉(zhuǎn)移的基礎(chǔ)。乳腺癌細(xì)胞自身分泌的uPA和VEGF是乳腺癌復(fù)發(fā)、浸潤(rùn)和遠(yuǎn)位轉(zhuǎn)移的細(xì)胞因子。MCF-7中細(xì)胞旁分泌大量的VEGF和uPA，兩者相互平行，是MVF-7復(fù)發(fā)和快速生長(zhǎng)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵因素。而BT474細(xì)

30、胞培養(yǎng)液中，uPA和VEGF不一致，VEGF分泌量多，uPA量少，與乳腺癌的病理類型有關(guān)，BT474容易在局部快速浸潤(rùn)生長(zhǎng)，早期血行轉(zhuǎn)移的可能性小[23]。AC中VEGF高表達(dá)可能是脂肪顆粒移植后組織的生長(zhǎng)過程中血管形成和組織發(fā)育的關(guān)鍵因素之一，保持AC含量是脂肪組織成活的關(guān)鍵。同時(shí)也提供了“癌床”微環(huán)境腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的血管基礎(chǔ)。乳腺癌細(xì)胞不分泌MMP2，而hADSCs、AC分泌MMP2，由于腫瘤細(xì)胞的“竊取效應(yīng)”，hADSCs成脂前后對(duì)

31、乳腺癌細(xì)胞主要是局部影響[剮。整個(gè)成脂過程中，脂肪庫的增加，也為腫瘤細(xì)胞提供能源基礎(chǔ)，加強(qiáng)乳腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)以及轉(zhuǎn)移需要的能源動(dòng)力。
　　 5 PPARγ蛋白在MCF-7、BT474中無表達(dá)，其影響腫瘤細(xì)胞周期，促進(jìn)細(xì)胞增殖，處于低分化狀態(tài)，具有抑癌作用[24]。hADSCs成脂分化前后，PPARγ蛋白受到抑制，也許會(huì)影響hADSCs成脂分化。aP2在MCF-7、BT474均有表達(dá)，但MCF-7表達(dá)高，aP2與原癌基因結(jié)合，

32、促進(jìn)癌細(xì)胞增殖、浸潤(rùn)等[25]。aP2在腫瘤細(xì)胞中無法通過PPARγ調(diào)節(jié)細(xì)胞儲(chǔ)脂，但轉(zhuǎn)運(yùn)脂肪能力增加，利用周圍脂肪微環(huán)境，低能量轉(zhuǎn)運(yùn)脂肪，在“癌床”微環(huán)境下，為乳腺癌細(xì)胞代謝、轉(zhuǎn)移等提供能源。
　　 6低量的顆粒脂肪移植，hADSCs附著在脂肪顆粒支架上，可充分增加移植物和hADSCs早期與血漿的接觸，促進(jìn)成活。細(xì)胞活性增加后，可為血管形成提供內(nèi)皮細(xì)胞分化基礎(chǔ)，增加VEGF分泌量，新生大量血管，為脂肪顆粒成活提供有效的血供。但在