梅笠草素體外抗人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的活性及其作用機(jī)制研究.pdf

1、梅笠草素是從鹿蹄草（Passiflora incarnate Fisch）中提取的萘醌類物質(zhì)，學(xué)名是2，7-二甲基-1，4-萘醌，據(jù)文獻(xiàn)研究結(jié)果顯示梅笠草素具有抗腫瘤等多種活性。在本研究中，主要研究的是梅笠草素對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的抗腫瘤活性及其分子機(jī)制。其研究結(jié)果如下：
　　1、梅笠草素能夠濃度而非時(shí)間依賴性地抑制人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的增殖生長(zhǎng)。利用MTT法檢測(cè)梅笠草素分別作用人乳腺癌MCF-7細(xì)胞24 h、48 h和72

2、 h后的增殖抑制作用。其IC50分別是43.30±2.47μM、43.26±2.06μM和44.10±1.84μM。
　　2、梅笠草素能夠誘導(dǎo)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的凋亡。利用吖啶橙(AO)熒光檢測(cè)法、DNA Ladder法和AnnexinⅤ-FITC/PI熒光檢測(cè)法分別檢測(cè)梅笠草素作用于人乳腺癌MCF-7細(xì)胞48 h后細(xì)胞凋亡的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，梅笠草素能夠濃度依賴性地使細(xì)胞細(xì)胞核中染色質(zhì)發(fā)生新月形的凝聚、細(xì)胞DNA產(chǎn)生片段化

3、和使細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)的磷脂酰絲氨酸外翻，從而誘導(dǎo)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的凋亡。
　　3、梅笠草素能夠通過Mitochondrial/Caspases凋亡途徑誘導(dǎo)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的凋亡。利用羅丹明123染色法和Western blotting法檢測(cè)不同濃度的梅笠草素對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的變化影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明梅笠草素能夠濃度依賴性地降低細(xì)胞中線粒體的膜電位，并能增加細(xì)胞中Bad/Bcl-2的蛋白表達(dá)比，激活凋亡蛋白Caspase

4、-9、Caspase-3和失活PARP，從而誘導(dǎo)細(xì)胞的凋亡。
　　4、 ROS是梅笠草素誘導(dǎo)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞凋亡的主要誘因之一。利用DCFH-DA熒光染色法和Western blotting法進(jìn)行檢測(cè)梅笠草素對(duì)細(xì)胞中ROS的變化影響和ROS對(duì)梅笠草素誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，梅笠草素能夠升高人乳腺癌巾ROS的含量，但加入ROS抑制劑NAC后，能夠抑制梅笠草素誘導(dǎo)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的凋亡。
　　綜上所述，梅笠