豬FBXO8基因結(jié)構(gòu)及功能的初步研究.pdf

1、豬的遺傳改良一直是養(yǎng)豬業(yè)界科技工作者關(guān)注的重點(diǎn),傳統(tǒng)育種手段在豬的品種改良方面取得了顯著成效。隨著生命科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,尤其是分子生物學(xué)領(lǐng)域的不斷突破,分子育種將成為豬遺傳改良的重要手段。
　　 任何經(jīng)濟(jì)性狀的形成都是受復(fù)雜的遺傳調(diào)控。蛋白質(zhì)是生命活動(dòng)的具體執(zhí)行者,泛素-蛋白酶體途徑是一種重要的蛋白質(zhì)降解系統(tǒng),是調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)水平的重要機(jī)制。通過降解許多諸如細(xì)胞周期因子、轉(zhuǎn)錄因子等蛋白,從而參與調(diào)節(jié)許多重要的生命活動(dòng)。
　

2、　 泛素蛋白酶體途徑最主要的特征就是底物的多樣性和選擇性,而這一功能主要是由泛素-蛋白連接酶E3s的F-box基序直接決定的。本研究利用生物信息學(xué)與分子生物學(xué)技術(shù)相結(jié)合的方法,克隆獲得了豬F-box家族的FBXO8基因,初步取得了如下結(jié)果:
　　 1.利用網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)庫的信息,通過生物信息學(xué)手段,電子克隆到豬FBXO8基因的編碼序列并對其進(jìn)行了系統(tǒng)的生物信息學(xué)研究。
　　 2.結(jié)合豬EST數(shù)據(jù)庫的信息,分離并鑒定了豬FBX

3、O8的功能序列。
　　 3.用RT-PCR的方法,對豬FBXO8基因進(jìn)行了組織表達(dá)譜分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)這個(gè)基因在所檢測的成年五指山豬16個(gè)組織中有8個(gè)組織有不同程度的表達(dá)。
　　 4.使用pEGFP-N1載體構(gòu)建了人源、豬FBXO8的亞細(xì)胞定位載體。在人肺腺癌細(xì)胞系(A549)、豬腎細(xì)胞(PK15)上分別進(jìn)行了人、豬亞細(xì)胞定位的研究。由人源FBXO8的亞細(xì)胞定位顯示,FBXO8主要分布在細(xì)胞質(zhì)中。
　　 5.構(gòu)建了豬