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文檔簡(jiǎn)介
1、本文是在本實(shí)驗(yàn)室研究抗性和敏感性小菜蛾高溫(37℃)條件下適合度與其體內(nèi)Hsp70表達(dá)量關(guān)系的基礎(chǔ)之上，進(jìn)一步利用分子生物學(xué)的相關(guān)知識(shí)，克隆小菜蛾hsp70基因片段并以此為模板合成探針進(jìn)行Northern雜交，研究抗性和敏感性小菜蛾在高溫誘導(dǎo)下hsp70mRNA表達(dá)量之間的差異。本研究在登陸Genbank，BLAST昆蟲hsp70，選取保守區(qū)域利用Primer5.0軟件，設(shè)計(jì)了兩對(duì)引物，PCR產(chǎn)物純化后送Invitrogen公司進(jìn)行TA
2、克隆后測(cè)序，主要研究結(jié)果如下： 1.在小菜的上下游區(qū)域分別克隆出一條600bp和680bp的片段，與其他昆蟲進(jìn)行BLAST同源性比對(duì)，同源性在83％～86％之間。 2.克隆出的兩個(gè)片段中間有重復(fù)區(qū)域，接拼之后獲得長(zhǎng)度為857bp小菜蛾hsp70的片段。與其他昆蟲進(jìn)行BLAST同源性比對(duì)，同源性在84％～86％之間。故推測(cè)此序列為小菜蛾hsp70 mRNA的序列。 3.雜交結(jié)果表明：抗性和敏感性小菜蛾在常溫和37℃
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