JDP2(Jun dimerization protein2)與人胰腺癌EMT之間關系的研究.pdf

1、前言：
　　 胰腺癌是一種發(fā)病隱匿、進展迅速、治療效果及預后極差的消化道惡性腫瘤?；颊咴\斷為胰腺癌后5年生存率小于5%。這種極差的預后主要與其發(fā)生早期微轉移及患者臨床癥狀不顯著有關。因此,探索新的胰腺癌的分子標志物對于胰腺癌的治療具有重要意義。
　　 Epithelial-to-mescnchymaltransition(EMT)是上皮細胞呈現(xiàn)間質細胞的形態(tài)。上皮細胞形成EMT主要標志有如:上皮標志物E-cadherin

2、表達的降低以及間質標志物vimentin、snail及N-cadhedn表達的升高。在典型的EMT的模型中,細胞與細胞之間失去極性,呈現(xiàn)出典型的形態(tài)學改變。形成EMT的細胞表現(xiàn)出更強侵襲能力。越來越多的證據(jù)證明EMT與多種生長因子有關,如轉移生長因子(TGF-β1),表皮生長因子(EGF)等。但是,EMT形成的機制到目前為止還不是非常明確。
　　 Jundimerizationprotein2(JDP2),作為AP-1類抑制因子

3、之一,最初是作為AP-1成員之一的c-Jun的結合蛋白分離出來的。AP-1是由Jun,Fos或ATF蛋白系列所構成的二聚體,其功能涉及細胞周期調節(jié),細胞分化,凋亡及腫瘤的發(fā)生等方面。JDP2由163個氨基酸組成,并含有一個堿性亮氨酸拉鏈(basicleucinezipper,bZIP)結構。JDP2可以和自身以及c-Jun,JunB,JunD或ATF-2形成二聚體,并抑制Jun,c-Fos和ATF-2等的轉錄活性,顯示JDP2是一種廣泛

4、的AP-1抑制蛋白。在深入研究其轉錄調控機制的過程中,課題組成員發(fā)現(xiàn),JDP2是通過回收HDAC3(histonedeacetylase3)到原癌基因c-jun的調控領域的方式來抑制其表達。
　　 目的：
　　 研究JDP2與人胰腺癌EMT之間的關系。通過探討JDP2與人胰腺癌EMT之間的關系來找到可能的新的胰腺癌早期治療、診斷的靶點。
　　 方法：
　　 我們選擇36例自2000年2月至2003年11月

5、在中國醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院手術切除胰腺癌標本。BxPC3細胞用含10%FBS的RPMI1640培養(yǎng),同時在培養(yǎng)基中加入EGF(100ng/ml)以及TGF-β1(10ng/m1),之后用pCEFL-HA-JDP2質粒瞬時轉染上述BxPC3細胞。pGEX-ATF2質粒被瞬時轉染至Capan2胰腺癌細胞系中,48小時后繼續(xù)用TGF-β1(10ng/ml)誘導48小時。如上細胞均經(jīng)Westernblot、RT-PCR、qRT-PCR、tran

6、swell侵襲實驗、MTT及免疫熒光檢測。
　　 結果：
　　 為了驗證JDP2的表達與胰腺癌之間的關系,我們應用Westernblot檢測36胰腺癌標本癌和癌旁的JDP2蛋白表達,結果證明所有癌組織的JDP2表達明顯低于癌旁組織。我們還發(fā)現(xiàn)TGF-β1聯(lián)合EGF共同誘導可使BxPC3細胞產(chǎn)生EMT.而這種EMT可以被過表達的JDP2所逆轉。而過表達ATF2的Capan2細胞對TGF-β1的刺激變得更加敏感,產(chǎn)生EMT.