miR-181b-ZEB2反饋通路對(duì)胰腺癌細(xì)胞EMT的影響及機(jī)制研究.pdf

1、背景：
　　胰腺癌是一種惡性程度很高的腫瘤，其病程的早期即容易發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，對(duì)放療、化療均不敏感，其5年生存率小于5％[1]。已有研究發(fā)現(xiàn)，在胰腺癌腫瘤細(xì)胞發(fā)生EMT（上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化）的過(guò)程中，E-鈣黏蛋白表達(dá)下降，波形蛋白表達(dá)上升，從而使胰腺癌發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，并導(dǎo)致較差的預(yù)后[2,3]。
　　目前對(duì)胰腺癌中EMT的上游調(diào)節(jié)機(jī)制的研究尚不充分，尋找EMT抑制性調(diào)節(jié)因子尤為重要。miRNA能夠在轉(zhuǎn)錄水平調(diào)節(jié)mRNA的表達(dá)，是近年來(lái)

2、的研究熱點(diǎn)，胰腺癌中能夠抑制EMT的miRNAs可能成為診斷標(biāo)志物及治療靶點(diǎn)。
　　目的：
　　以胰腺癌細(xì)胞株SW1990為研究對(duì)象，檢測(cè)miR-181b/ZEB2反饋通路對(duì)胰腺癌細(xì)胞株SW1990中EMT過(guò)程的影響。
　　方法：
　　1.MTT和流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)miR-181b對(duì)SW1990細(xì)胞株增殖及凋亡的影響。
　　2.qRT-PCR和Western blotting檢測(cè)miR-181b對(duì)SW1990

3、細(xì)胞株ZEB2、Virnentin和E-cadherln表達(dá)的影響。
　　2. ChIP-PCR檢測(cè)SW1990中ZEB2與miR-181b啟動(dòng)子之間是否有直接結(jié)合的關(guān)系。
　　3.雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)檢測(cè)ZEB2對(duì)miR-181b表達(dá)的影響。
　　結(jié)果：
　　1. miR-181b促進(jìn)SW1990細(xì)胞株凋亡，抑制其增殖。
　　2. miR-181b-mimic轉(zhuǎn)染細(xì)胞后，E-cadherln的表達(dá)水平顯