番茄斑萎病毒移動(dòng)蛋白NSm的胞間移動(dòng)與誘導(dǎo)過(guò)敏反應(yīng)的偶聯(lián)性研究.pdf

1、番茄斑萎病毒（Tomato spotted wilt virus，TSWV）的非結(jié)構(gòu)蛋白NSm具有典型的移動(dòng)蛋白（Movement Protein，MPs）特征，包括在早期系統(tǒng)侵染階段快速表達(dá)、定位于胞間連絲、形成小管結(jié)構(gòu)，胞間連絲的修飾、具有RNA結(jié)合活性并能與N蛋白和寄主的運(yùn)輸?shù)鞍谆プ鞯取Sm最主要的功能是作為移動(dòng)蛋白來(lái)促進(jìn)病毒在細(xì)胞間發(fā)生移動(dòng)。近來(lái)，研究發(fā)現(xiàn)TSWV NSm能夠作為無(wú)毒基因激發(fā)番茄Sw-5b介導(dǎo)的過(guò)敏性反應(yīng)(Hy

2、persensitive Response，HR)。然而，NSm的胞間移動(dòng)功能與誘導(dǎo)HR反應(yīng)功能之間是否偶聯(lián)卻尚不清楚。
　　在本研究中，利用農(nóng)桿菌浸潤(rùn)法分別將番茄抗病基因Sw-5b、TSWV NSm野生型及突變體基因構(gòu)建到植物表達(dá)載體上，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)浸潤(rùn)本氏煙葉片，探究NSm的胞間移動(dòng)功能與介導(dǎo)Sw-5b產(chǎn)生HR反應(yīng)兩功能之間是否偶聯(lián)。之前研究發(fā)現(xiàn)TSWVNSm的A54-56、A122-125，A154和A269-274的突變體

3、不再形成小管結(jié)構(gòu)，本研究利用這些位點(diǎn)進(jìn)行了相應(yīng)的突變，結(jié)果表明其不再定位到胞間連絲(PD)上且不再具有胞間移動(dòng)的功能，而這些喪失移動(dòng)功能的突變體仍然可以在Sw-5b的介導(dǎo)下產(chǎn)生HR反應(yīng)。NSm抗性突破株系的單突變體C118Y或T120N不再誘導(dǎo)HR反應(yīng)卻仍然具有移動(dòng)功能，而將單突變體分別引入失去移動(dòng)功能的NSmA54-56突變體中則導(dǎo)致其不再誘發(fā)HR反應(yīng)。
　　綜上所述，TSWV NSm蛋白的胞間移動(dòng)的功能與誘導(dǎo)HR反應(yīng)的功能兩者