異丙酚單次劑量和恒速靜脈注射在犬腦的攝取和分布.pdf

1、靜脈麻醉是臨床不可或缺的重要手段，廣泛應(yīng)用于臨床麻醉、ICU鎮(zhèn)靜催眠和門診特殊診療等方方面面，但至今其麻醉機(jī)制尚未闡明。腦作為靜脈麻醉藥的效應(yīng)器官，腦內(nèi)藥物濃度決定了藥效，了解靜脈麻醉藥腦內(nèi)藥代動力學(xué)和藥效學(xué)規(guī)律對于探索全麻作用機(jī)理、指導(dǎo)臨床合理用藥有重要的意義。目前，對人腦內(nèi)靜脈麻醉藥濃度還無法直接測定，需要一種間接的測量手段，以滿足對效應(yīng)室藥代動力學(xué)和藥效學(xué)的探索，靜脈麻醉藥的腦攝取研究即由此發(fā)展而來。異丙酚作為目前臨床廣泛使用的全

2、身麻醉藥，成為靜脈麻醉藥腦攝取研究的主要對象。本研究探索了HPLC-UV-沉淀法測量異丙酚腦組織濃度和血漿濃度的可行性。 單次劑量靜脈注射多用于全麻誘導(dǎo)和門診小手術(shù)或腔鏡檢查等門診檢查或治療，恒速靜脈注射常用于全麻維持和ICU病人的鎮(zhèn)靜和催眠。本研究觀察異丙酚上述兩種不同全麻狀態(tài)下，解剖并測量犬腦不同組織中異丙酚濃度，探索基于解剖和直接測量技術(shù)的異丙酚腦攝取研究的可行性，以了解不同腦組織對異丙酚的攝取和分布規(guī)律。同時(shí)，根據(jù)異丙酚

3、腦分布特征結(jié)合其它相關(guān)研究成果探討異丙酚可能的全麻作用機(jī)制。選擇舒芬太尼為干擾藥物，觀察舒芬太尼作用下犬腦不同組織中異丙酚的濃度變化，對異丙酚腦攝取和腦分布受其它麻醉藥物的影響程度作初步探索。 第一部分：異丙酚單次劑量靜脈注射在犬腦的攝取和分布 目的：觀察異丙酚7mg·kg-1靜脈注射和伍用舒芬太尼1μg·kg-1在犬腦的攝取和分布。 材料和方法： 實(shí)驗(yàn)動物準(zhǔn)備與分組：12只年齡12-18個月、體重10-

4、12kg雄性健康犬，隨機(jī)分為A組(異丙酚組)和B組(異丙酚+舒芬太尼組)。實(shí)驗(yàn)均安排在白晝，實(shí)驗(yàn)前禁食、禁飲8小時(shí)，實(shí)驗(yàn)時(shí)由右后肢大隱靜脈建立靜脈通路并保持通暢。 麻醉實(shí)施：A組異丙酚7mg·kg-1靜脈注射； B組舒芬太尼1μg·kg-1靜脈注射后，立即注入異丙酚7mg·kg-1。 A、B組異丙酚注射時(shí)間均為15s，預(yù)定麻醉狀態(tài)均為眼瞼反射和踏板反射消失。 標(biāo)本采集：達(dá)到預(yù)定麻醉狀態(tài)后解剖犬右側(cè)頸內(nèi)動、

5、靜脈，各取血2ml快速注入抗凝管中，4℃冰箱中保存。斷頭法處死實(shí)驗(yàn)犬。無菌條件下去除顱蓋等組織，專人解剖獲取額葉、頂葉、顳葉、海馬、扣帶回、丘腦、中腦、橋腦和小腦組織，分別置于無菌干燥培養(yǎng)皿中，-17℃低溫冰箱中保存。 標(biāo)本處理：血標(biāo)本在4℃低溫離心機(jī)中離心30min(10000r·min-1)。取血漿200μl置于EP管中，加入乙腈400μl，渦旋器震蕩2min后再離心10min(10000r·min-1)，取上清液于EP管中

6、保存。腦組織樣品精確稱量后置于勻漿器中，加入乙腈(2ml·g-1)充分勻漿，勻漿液離心4min(10000r·min-1)后取上清液于EP管中保存。 異丙酚色譜分析：采用HPLC-UV-沉淀法測量異丙酚濃度，外標(biāo)物為異丙酚標(biāo)準(zhǔn)品。色譜柱為DikmaDiamonsilC18柱(200mE×4.6mm，5μm)，柱溫4℃。流動相A為乙酸胺(1mmol·L-1)和乙酸(1g·L-1)，流動相B為甲醇，A:B為25:75。自動進(jìn)樣量20

7、μl，流速1ml·min-1，檢測波長270nm。 數(shù)據(jù)分析：采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論： 1.異丙酚單次靜脈注射達(dá)到犬眼瞼反射和踏板反射消失即刻，異丙酚腦攝取尚未達(dá)到平衡狀態(tài)。此時(shí)異丙酚在犬腦內(nèi)的分布不均衡，丘腦最高，海馬最低。 2.舒芬太尼(1μg·kg-1)對上述麻醉狀態(tài)異丙酚腦攝取和分布的影響不明顯。

8、3.HPLC-UV-沉淀法使用異丙酚標(biāo)準(zhǔn)品為外標(biāo)物、純乙腈為提取劑，測量的線性關(guān)系好，回收率高，適用于對腦組織和血漿異丙酚濃度的測定。 第二部分：異丙酚恒速靜脈注射在犬腦的攝取和分布 目的：觀察異丙酚恒速泵注至腦攝取平衡狀態(tài)時(shí)，異丙酚在犬腦額葉、頂葉、顳葉、海馬、扣帶回、丘腦、中腦、橋腦、小腦的分布。 材料和方法： 實(shí)驗(yàn)動物準(zhǔn)備：6只年齡12-18個月、體重10-12kg雄性健康犬，實(shí)驗(yàn)前禁食、禁飲8小時(shí)

9、。實(shí)驗(yàn)均安排在白晝，實(shí)驗(yàn)時(shí)由右后肢大隱靜脈建立靜脈通路并保持通暢。 麻醉實(shí)施：各犬以異丙酚7mg·kg-1靜脈注射，續(xù)以70mg·kg-1·h-1恒速靜脈泵注。 標(biāo)本采集：達(dá)到麻醉狀態(tài)后解剖犬右側(cè)頸內(nèi)動、靜脈，泵注30min(T30)、50min(T50)時(shí)分別取頸內(nèi)動脈和頸內(nèi)靜脈血2ml，快速注入抗凝管中，4℃冰箱中保存。T50時(shí)斷頭法處死實(shí)驗(yàn)犬，無菌條件下去除顱蓋等組織，專人解剖取額葉、頂葉、顳葉、海馬、扣帶回、丘腦

10、、中腦、橋腦、小腦組織。分別置于無菌干燥培養(yǎng)皿中，-17℃低溫冰箱中保存。 標(biāo)本處理：血標(biāo)本在4℃低溫離心機(jī)中離心30min(10000r·min-1)。取血漿200μ1置于EP管中，加入乙腈400μ1，渦旋器震蕩2min后再離心10min(10000r·min-1)，取上清液于EP管中保存。腦組織樣品精確稱量后置于勻漿器中，加入乙腈(2ml·g-1)充分勻漿，勻漿液離心4min(10000r·min-1)后取上清液于EP管中保

11、存。 異丙酚色譜分析：采用HPLC-UV-沉淀法測量異丙酚濃度，外標(biāo)物為異丙酚標(biāo)準(zhǔn)品。色譜柱為Dikma，DiamonsilC18柱(200mm×4.6mm，5μm)，柱溫4℃。流動相A為乙酸胺(1mmol·L-1)和乙酸(1g·L-1)，流動相B為甲醇，A:B為25:75。自動進(jìn)樣量20μl，流速1ml·min-1，檢測波長270nm。 數(shù)據(jù)分析：采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表

12、示。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論： 1.犬腦對異丙酚的攝取在恒速泵注30、50min時(shí)均處于平衡狀態(tài)； 2.腦攝取平衡時(shí)，異丙酚在犬腦額葉、頂葉、顳葉、海馬、扣帶回、丘腦、中腦、橋腦、小腦呈均衡分布。 通過對異丙酚單次劑量和恒速靜脈注射在犬腦的攝取和分布的研究，本文得出如下結(jié)論： 1.異丙酚單次靜脈注射達(dá)到犬眼瞼反射和踏板反射消失即刻，異丙酚腦攝取尚未達(dá)到平衡狀態(tài)。此時(shí)異丙酚在犬腦內(nèi)的分

13、布不均衡，丘腦最高，海馬最低。 2.舒芬太尼(1μg·kg-1)對上述麻醉狀態(tài)異丙酚腦攝取和分布的影響不明顯。 3.犬腦對異丙酚的攝取在恒速泵注30、50min時(shí)均處于平衡狀態(tài)；腦攝取平衡時(shí)，異丙酚在犬腦額葉、頂葉、顳葉、海馬、扣帶回、丘腦、中腦、橋腦、小腦呈均衡分布。 4.異丙酚恒速靜脈注射至腦攝取達(dá)到平衡時(shí)的腦分布，與單次靜脈注射達(dá)到眼瞼反射和踏板反射消失即刻的分布特征不同(前者在犬腦組織呈均衡分布，后者分布