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1、上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文熱刺激條件下血管內(nèi)皮細(xì)胞的形態(tài)變化及凋亡研究姓名:周鳴杰申請學(xué)位級別:博士專業(yè):生物醫(yī)學(xué)工程指導(dǎo)教師:徐學(xué)敏20080101摘要粒轉(zhuǎn)染血管內(nèi)皮細(xì)胞后建立單克隆細(xì)胞系,利用該細(xì)胞系及激光共聚焦熒光顯微鏡對血管內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行實(shí)時觀察,研究了加熱過程中血管內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞骨架的實(shí)時變化。結(jié)果表明,細(xì)胞微絲骨架的變化與其形態(tài)以及細(xì)胞之間連接的變化幾乎是同步發(fā)生的,說明了血管內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)以及細(xì)胞之間連接發(fā)生變化的內(nèi)在原因是細(xì)胞內(nèi)
2、微絲骨架受熱發(fā)生了解聚。熱療結(jié)合化療除了對腫瘤細(xì)胞有殺傷作用外,其對血管內(nèi)皮細(xì)胞的直接殺傷作用也是熱療增強(qiáng)療效的重要機(jī)制。我們進(jìn)一步研究了熱刺激以后血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷,結(jié)果顯示血管內(nèi)皮細(xì)胞在450c/j口熱以后,細(xì)胞的表面出現(xiàn)了大量凋亡小體。我們又用熒光雙染色的方法定量分析了血管內(nèi)皮細(xì)胞在不同溫度下細(xì)胞存活率、凋亡率和壞死率隨時間變化的情況,結(jié)果表明血管內(nèi)皮細(xì)胞死亡的模式與溫度的高低密切相關(guān):當(dāng)溫度低于45。C時,細(xì)胞的死亡模式以發(fā)生凋
3、亡為主,而當(dāng)溫度大于45。C時,細(xì)胞的死亡模式以壞死為主。已有的研究發(fā)現(xiàn)熱刺激以后腫瘤環(huán)境下的血管內(nèi)皮細(xì)胞比正常血管內(nèi)皮細(xì)胞死亡率更高,對熱的刺激更加敏感。我們通過進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)證明溫度處于43—45℃時,腫瘤環(huán)境下的血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡率要大于正常血管內(nèi)皮細(xì)胞。除了本研究所涉及的熱刺激引起血管內(nèi)皮細(xì)胞微絲骨架以及細(xì)胞發(fā)生凋亡、壞死的研究,已有的一些研究還對熱刺激過程中血管內(nèi)皮細(xì)胞胞內(nèi)鈣離子濃度以及熱激蛋白(HSP)水平變化等細(xì)胞水平的現(xiàn)象進(jìn)
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