疏筋解毒方對(duì)6-OHDA大鼠內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激轉(zhuǎn)錄表達(dá)干預(yù)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　 檢測(cè)疏筋解毒方對(duì)帕金森模型大鼠黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白基因表達(dá)的影響，探討其抑制黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元細(xì)胞凋亡的可能機(jī)制。
　　 方法：
　　 采用大鼠腦立體定位注射6-羥基多巴胺方法建立帕金森模型，按照分層隨機(jī)分組方法分為假手術(shù)組（S）、模型組（M）、西藥組（W）、中藥組（C）,藥物干預(yù)1d、7d、14d、21d、30d 進(jìn)行大鼠行為學(xué)觀察；灌胃治療14d、21d、30d、45d、60

2、d分期采用RT-PCR 技術(shù)檢測(cè)各組GRP78 mRNA、Caspase-12 mRNA表達(dá)；運(yùn)用免疫組化法檢測(cè)各組大鼠黑質(zhì)GRP78、Caspase-12表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1．疏筋解毒方對(duì)帕金森病大鼠行為學(xué)的影響
　　 采用西藥、中藥治療7d后平均轉(zhuǎn)速和持續(xù)時(shí)間改善有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；與西藥組比較，中藥組在持續(xù)時(shí)間上改善明顯，14d、21d、30d 均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；且中藥組作

3、用持久，治療7d、14d、21d、30d均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　 2.疏筋解毒方對(duì)PD大鼠中腦黑質(zhì)GRP78 mRNA、Caspase-12 mRNA表達(dá)水平的影響
　　 GRP78 mRNA表達(dá)水平結(jié)果顯示：模型組14d、21d、30d 逐漸上升,45d、60d逐漸下降，與模型組比較，中藥組30d 下降具有顯著性差異（P<0.01）；中藥組60d上升、西藥組45d上升有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；與西藥組

4、比較，中藥組45d下降有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。Caspase-12 mRNA表達(dá)水平結(jié)果顯示：模型組14d、21d、30d、45d逐漸上升，60d下降；與模型組比較，中藥組45d下降具有顯著性差異（P<0.01）；中藥組30d下降，西藥組30d上升有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；與西藥組比較，中藥組45d下降具有顯著性差異（P<0.01）。
　　 3.疏筋解毒方對(duì)PD大鼠黑質(zhì)內(nèi)GRP78、Caspase-12蛋白表達(dá)的影響<

5、br>　　 GRP78蛋白表達(dá)隨時(shí)間改變,30d達(dá)峰值，與同組前期比較，模型組、西藥組、中藥組具有顯著性差異（P<0.01）；與模型組比較，中藥組30d、45d、60d具有顯著性差異（P<0.01)；與西藥組比較，中藥組30d下降具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。Caspase-12蛋白表達(dá)隨時(shí)間改變,45d達(dá)峰值，與同組前期比較，模型組、西藥組、中藥組30d上升具有顯著性差異（P<0.01），與模型組比較，中藥組30d、45d、60d

6、具有顯著性差異（P<0.01），與西藥組比較，中藥組30d、60d下降具有顯著性差異（P<0.01）。
　　 結(jié)論：
　　 1.6-OHDA注射毀損法制備偏側(cè)PD大鼠模型，癥狀在14d后出現(xiàn)明顯變化，而疏筋解毒方在7d時(shí)即可表現(xiàn)出改善癥狀，尤其在改善持續(xù)時(shí)間上效果明顯且持久。
　　 2.疏筋解毒方具有雙向調(diào)節(jié)黑質(zhì)DA能神經(jīng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜伴侶蛋白GRP78，既能防止早期表達(dá)水平過高，上升過快而導(dǎo)致應(yīng)激損傷，又能調(diào)節(jié)后期下