中藥成分CDP對(duì)直腸癌HCT-15細(xì)胞增殖的影響及其機(jī)制研究.pdf

1、目的:研究中藥成分CDP(二磷酸胞苷)對(duì)人直腸癌 HCT-15細(xì)胞增殖影響,并探討其可能的機(jī)制。
　　方法:體外培養(yǎng)人直腸癌HCT-15細(xì)胞,MTT法(四甲基偶氮唑鹽比色法)觀察不同濃度中藥成分 CDP(0、25、50、75、100、125 umol/L)處理(24h、48h、72h)后其增殖變化,倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化。流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期。RT-PCR檢測(cè)中藥成分CDP對(duì)HCT-15細(xì)胞Sfrp2的mRNA的表達(dá)變化。

2、Western blotting檢測(cè)中藥成分CDP對(duì)HCT-15細(xì)胞Sfrp2的蛋白表達(dá)變化。
　　結(jié)果:四甲基偶氮唑鹽比色法(MTT)結(jié)果分析表明中藥成分 CDP能顯著抑制HCT-15細(xì)胞分裂增殖,其抑制率隨著藥物濃度的升高而增強(qiáng);隨著時(shí)間的延長(zhǎng)抑制效應(yīng)無明顯增強(qiáng);倒置顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)被中藥成分CDP處理后的直腸癌HCT-15細(xì)胞密度呈劑量性減低,體積縮小、融為空泡、并且漂浮于培養(yǎng)基等細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)特征;用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期

3、觀察到中藥成分CDP將直腸癌HCT-15細(xì)胞阻滯在S期,呈現(xiàn)劑量依賴性。采用50、75、100 umol/L中藥成分 CDP作用于直腸癌HCT-15細(xì)胞24h,RT-PCR檢測(cè)Sfrp2的mRNA的表達(dá)逐漸增加,呈現(xiàn)劑量依賴性。采用50、75、100 umol/L中藥成分 CDP作用于直腸癌HCT-15細(xì)胞24h,用Western blotting檢測(cè)Sfrp2的蛋白表達(dá)量逐漸增加,呈現(xiàn)劑量依賴性。
　　結(jié)論:中藥成分CDP能夠抑