桃兒七種子成分分析和不同組織鬼臼毒素含量的比較研究.pdf

1、鬼臼毒素（podophylotoxin，C22H22O8）屬于木脂體類（lignans），主要存在于小檗科（Berberidaceae）多年生草本類群鬼臼亞科（Podophylloideae）八角蓮屬（Dysosma Woodson）、桃兒七屬（Sinopodophyllum Ying）、山荷葉屬（Diphylleia Michx）及足葉草屬（Podophyllum L.）植物中，其中尤以桃兒七中鬼臼毒素含量最高。桃兒七生長(zhǎng)緩慢，人工栽

2、培困難，加之近年來(lái)藥用市場(chǎng)對(duì)鬼臼毒素需求增加以及對(duì)其野生資源的過度開發(fā)與利用，導(dǎo)致桃兒七資源的匱乏與瀕危，于1992年被列入《中國(guó)珍稀瀕危植物名錄》并被《中國(guó)植物紅皮書》收錄。本試驗(yàn)利用氣相色譜-質(zhì)譜技術(shù)（GC-MS）對(duì)桃兒七種子成分進(jìn)行了分析，為探討桃兒七種子中各化合物與其生理作用的關(guān)系奠定了一定的基礎(chǔ)；此外，利用細(xì)胞工程技術(shù)方法進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)“鬼臼毒素”是被公認(rèn)的一條保護(hù)、利用桃兒七這一稀缺資源的有效途徑。因此，對(duì)比測(cè)定野生材料和組

3、培材料中鬼臼毒素的含量，對(duì)于桃兒七組織培養(yǎng)中高“鬼臼毒素”培養(yǎng)系的篩選具有重要意義。本試驗(yàn)以野生桃兒七種子和不同離體組織為材料，利用GC-MS技術(shù)對(duì)種子成分進(jìn)行分析；利用超臨界二氧化碳萃取技術(shù)（CO2-SFE）對(duì)其不同組織器官中的鬼臼毒素進(jìn)行了提取分離和比較研究。取得如下研究結(jié)果：
　　 ⑴桃兒七種子成分的GC-MS分析。選用乙酸乙酯、無(wú)水乙醇、乙醚、氯仿四種不同溶劑對(duì)桃兒七種子進(jìn)行索式提取，并對(duì)其提取液進(jìn)行氣相色譜-質(zhì)譜（GC

4、-MS）聯(lián)用分析，比較不同溶劑的提取效果及鑒定其中的有機(jī)化合物。結(jié)果表明，不同溶劑的提取效果依次為：乙醚>氯仿>無(wú)水乙醇>乙酸乙酯；提取液中均含有的物質(zhì)有：棕櫚酸（Hexadecanoicacid），亞油酸（（Z，Z）-9，12-Octadecadienoic acid），油酸（Oleic acid），其中含量最高的為亞油酸，其余的檢出物質(zhì)主要是烷烴及芳香族化合物。
　　 ⑵超臨界二氧化碳（CO2-SFE）技術(shù)萃取桃兒七中鬼臼毒

5、素的工藝參數(shù)篩選及優(yōu)化。研究了影響超臨界二氧化碳萃?。–O2-SFE）桃兒七鬼臼毒素的萃取壓力、萃取溫度、萃取時(shí)間、CO2流量等幾個(gè)因素，根據(jù)中心組合（Box-Benhnken）試驗(yàn)設(shè)計(jì)原理的響應(yīng)面法（RSM）進(jìn)行優(yōu)化；利用高效液相色譜法（HPLC）作為鬼臼毒素的檢測(cè)方法。結(jié)果表明：SFE-CO2萃取桃兒七中鬼臼毒素的最佳工藝條件為：萃取壓力38MPa，萃取溫度50℃，萃取時(shí)間52min，在此條件下，鬼臼毒素提取率可達(dá)11.38％。