具有聚集誘導(dǎo)發(fā)光特性的TPE-Py-OH導(dǎo)致肝癌細(xì)胞死亡及其機(jī)制.pdf

1、目的：
　　具有聚集誘導(dǎo)發(fā)光(AIE)特性的分子近期在生物檢測(cè)領(lǐng)域發(fā)揮越來(lái)越重要的作用，由于其相對(duì)傳統(tǒng)熒光探針不可比擬的優(yōu)點(diǎn)，而常被用于細(xì)胞成像。在具有 AI E特性的化合物中，TP E及其衍生物的因其合成簡(jiǎn)便、發(fā)光性能優(yōu)良，因而作為在生物檢測(cè)領(lǐng)域應(yīng)用的探針擁有很大的優(yōu)勢(shì)。本研究則對(duì) TPE-Py-OH在細(xì)胞成像中的特點(diǎn)、生物毒性、在光誘導(dǎo)下殺滅癌細(xì)胞及其機(jī)制等一系列現(xiàn)象展開(kāi)討論。
　　方法：
　　配制 TPE-Py-

2、OH不同濃度用于肝癌細(xì)胞 Hepg2染色，在熒光顯微鏡下觀察熒光，摸索最佳染色濃度；發(fā)現(xiàn)其對(duì)細(xì)胞線粒體可能的特異性靶向標(biāo)記作用后，采用 TPE-Py-OH與現(xiàn)有商業(yè)線粒體紅色熒光探針對(duì)細(xì)胞進(jìn)行雙重染色，利用共聚焦顯微鏡驗(yàn)證探針在細(xì)胞內(nèi)分布及線粒體標(biāo)記。檢測(cè) TPE-Py-OH的生物相容性采用靈敏高效的CCK-8分析法，用于不同濃度 TPE-Py-OH對(duì) Hepg2細(xì)胞的毒性檢驗(yàn)。光動(dòng)力治療研究則用熒光顯微鏡下的藍(lán)光及普通強(qiáng)光手電筒兩種光

3、源作為誘導(dǎo)，對(duì)染有 TPE-Py-OH的Hepg2細(xì)胞進(jìn)行處理，并用 DCFH-DA監(jiān)測(cè)活性氧的生成；PI進(jìn)行細(xì)胞后續(xù)變化的觀測(cè)。最后，應(yīng)用電子透射顯微鏡通過(guò)對(duì)經(jīng)光動(dòng)力治療的細(xì)胞后續(xù)變化的觀察，了解到細(xì)胞死亡的主要機(jī)制。
　　結(jié)果：
　　細(xì)胞共聚焦顯微鏡下成像顯示 TPE-Py-OH在細(xì)胞內(nèi)的分布于線粒體紅色熒光探針完全重合，其本身聚集發(fā)出的黃色熒光可用于細(xì)胞成像。CCK-8結(jié)果顯示正常濃度 TP E-Py-O H對(duì)細(xì)胞活性

4、幾乎無(wú)影響，只有在極高濃度下才會(huì)產(chǎn)生較低的細(xì)胞毒性。而在光源誘導(dǎo)下，又可快速產(chǎn)生大量活性氧誘導(dǎo)細(xì)胞死亡。電鏡下則觀察到典型的細(xì)胞壞死過(guò)程。
　　結(jié)論：
　　TPE-Py-OH作為一種 AIE特性的熒光分子材料，同時(shí)具有精確靶向標(biāo)記線粒體及介導(dǎo)光動(dòng)力殺滅癌細(xì)胞作用。由于其高度的細(xì)胞相容性，可作為線粒體探針用于細(xì)胞長(zhǎng)期成像；另外以活性氧有效誘導(dǎo)細(xì)胞壞死及后續(xù)可能激活的凋亡機(jī)制，TPE-Py-OH在作為光敏劑用于光動(dòng)力治療上有著深