孕酮和米非司酮對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞株HHUA增殖抑制和凋亡作用的研究.pdf

1、目的：探討孕酮(Progesterone,P)和米非司酮(Mifepristone,RU486)聯(lián)合對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖抑制和凋亡的影響，為臨床治療子宮內(nèi)膜癌提供新方案。 方法：1、體外培養(yǎng)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞株HHUA。2、采用MTT方法檢測(cè)并繪制孕酮及米非司酮對(duì)HHUA細(xì)胞株的生長(zhǎng)曲線，分別計(jì)算兩種藥物的IC<,10>和IC<,50>值。3、應(yīng)用MTT方法檢測(cè)對(duì)照組、兩種藥物不同聯(lián)合濃度(PIC<,10>、RU486 IC<,10

2、>、PIC<,10>+RU486 IC<,10>、PIC<,50>、RU486 IC<,50>、PIC<,10>+Ru486IC<,50>、PIC<,50>+Ru486 IC<,10>、PIC<,50>+RU486 IC<,50>)干預(yù)24h、36h、48h吸光度值，計(jì)算細(xì)胞抑制率。4、利用RT-PCR技術(shù)與免疫細(xì)胞化學(xué)方法分別檢測(cè)兩種藥物不同濃度(P IC<,10>、Ru486 IC<,10>)、P IC<,10>+RU486 IC<

3、,10>、PIC<,50>、RU486 IC<,50>、P IC<,10>+RU486 IC<,50>、P IC<,50>+RU486 IC<,10>、PIC<,50>+RU486 IC<,50>)干預(yù)48小時(shí)后Bcl-2、Fas基因在轉(zhuǎn)錄及翻譯水平的表達(dá)，并與對(duì)照組進(jìn)行比較。 結(jié)果：1、MTT繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線結(jié)果顯示：孕酮和米非司酮作用于細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線均呈S形，孕酮IC<,10>：13.0547llmol/l、IC<,50>：

4、91.5584umol/l，米非司酮IC<,10>：7．5604umol/l、Ic<,50>：37．8352umol/l。2、MTT增殖實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：孕酮和米非司酮聯(lián)合用藥組比各單用藥組子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞抑制率高，48小時(shí)內(nèi)藥物作用呈時(shí)間依賴性。不同濃度聯(lián)合用藥組與各單用藥組之間均有差異(P<0.05)。3、免疫細(xì)胞化學(xué)結(jié)果顯示不同濃度孕酮和米非司酮培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞與對(duì)照組比較，及聯(lián)合用藥組與各單用藥組相比，Bcl-2表達(dá)減弱，F(xiàn)as表

5、達(dá)增強(qiáng)，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著(P<0.05)。4、RT-PCR結(jié)果顯示不同濃度孕酮和米非司酮培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞與對(duì)照組比較，及聯(lián)合用藥組與各單用藥組相比，Bcl-2 mKNA表達(dá)減弱，F(xiàn)as mRNA表達(dá)增強(qiáng)，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著(P<0.05)。 結(jié)論：1、孕酮和米非司酮均能有效抑制人子宮內(nèi)膜癌HHUA細(xì)胞株體外增殖，72小時(shí)內(nèi)呈濃度依賴性。2、孕酮和米非司酮聯(lián)合對(duì)人子宮內(nèi)膜癌HHuA細(xì)胞株的抑制增殖有協(xié)同作用，且高濃度組作用強(qiáng)于低濃度